改良CTAB法对山茶属植物基因组 DNA提取的比较研究.pdfVIP

- 江西农业大学学报 2017，39（4）：785 791 http：／ ／ Acta Agriculturae UniversitatisJiangxiensis DOI：10.13836／ j.jjau.2017102 张金丽，张罗霞，杨坤梅，等.改良CTAB法对山茶属植物基因组 DNA 提取的比较研究[J].江西农业大学学报，2017，39 - （4）：785 791. 改良CTAB 法对山茶属植物基因组 DNA提取的比较研究 1 2 3 1∗ 张金丽 ，张罗霞 ，杨坤梅 ，李宗艳 （西南林业大学 园林学院，云南 昆明 650224） 摘要：山茶属植物体内酚类、多糖等次生代谢物质含量较高，获得高纯度的总DNA 比较困难。 为筛选出适宜山 茶属植物基因组DNA 的较优提取方法，并研究不同材料处理方法的差异，采用四因素三水平的正交设计，对山 茶属植物基因组DNA 的提取方法CTAB法进行优化。 最后确定较优提取方法为：老叶用CTAB-free去除多糖 × 并防止酚氧化，用2％ CTAB、2％PVP、24∶1抽提2次；嫩叶用2 CTAB去除多糖并防止酚氧化，用 1％ CTAB、 2％ PVP、24∶1抽提1次，并用ISSR-PCR检测。 结果显示采用优化方案提取的DNA质量更好，能较好地溶于 TE，可用于ISSR-PCR扩增，且扩增出清晰的条带。 关键词：山茶，基因组DNA提取，改良CTAB法，正交设计 - - - 中图分类号：S794.401 文献标志码：A 文章编号：1000 2286（2017）04 0785 07 A Comparison Study on Extraction Methods for Genomic DNA from Tissues of Camellia Plants with Modified CTAB Method 1 2 3 1∗ ZHANGJin-li ，ZHANG Luo-xia ，YANG Kun-mei ，LI Zong-yan （College of Landscape Architecture，Southwest Forestry University，Kunming 650224） Abstract：It is difficult to get high-quality DNAfrom Camellia，which isrich in phenolic compound poly- saccharidesandother secondary metabolites.Inordertoselect abestoptimummethodforextractingthegenom- ic DNA from differentleavesof Camellia，anorthogonal designbyfourfactorsatthreelevelswascarriedoutto optimize the CTAB method for the genomic DNA extraction.Finally，the optimal extraction method was deter- mined th