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姜黄素纳米微球抗胶质瘤作用及其分子机制研究 无锡市人民医院 神经外科 程超 项目 由来 项目 意义 工作 成效 工作总结 项目 由来 项目 意义 工作 成效 工作总结 项目由来 脑胶 质瘤 特点：占比多，难全切除，恶性程度高 治疗：手术切除和放化疗等综合治疗 治疗新热点：纳米载药微球的靶向治疗 1 2 3 项目 由来 项目 意义 工作 成效 工作总结 项目意义 二亲嵌段共聚物高分子材料自动聚合形成“核-壳”结构的纳米固体胶束引人注目 1 姜黄素为天然的肿瘤化学预防剂 2 设计用聚己内脂－聚乙二醇的不同配比所合成的二亲嵌段共聚物来制备姜黄素的载药纳米微球，观察其在体外以及体内的的抗胶质瘤效果，相关机制及毒性 3 图1.载体材料的NMR色谱图 第一部分：姜黄素纳米微球的制备、表征 Table 1. Major characteristics of the synthesized PEG-PCL block copolymer Copolymers (feed ratio) PEG Mn Mna Mnb Mwb Pdb PCL20k-PEG4k 4000 26800 18600 30480 1.64 PCL30k-PEG10k 10000 42300 31980 49300 1.54 载体特性 a determined by 1H-NMR b determined by GPC Pd: Polydispersity, defined as the ratio of weight-average molecular weight to the number-average molecular weight (Mw/Mn) 理论分子量与实际分子量基本一致，最终产物与设计相符 载体特征 Table 2. Mean particle size and drug load efficiency of nanoparticles Nanoparticles Particle size (nm)a Polydispersity Zeta potential (mV) DLC (%)b EE (%)c PCL20k-PEG4k 78.3±7.9 0.14±0.04 －6.1±1.4 19.4±2.4 91.2±4.6 PCL30k-PEG10k 95.3±6.5 0.16±0.06 －9.8±1.4 14.2±1.9 87.6±5.4 Blank np 75.1±1.2 0.14±0.04 －5.4±1.3 ∕ ∕ a The SD value was for the mean particle size obtained from the three measurements of a single batch. b DLC = Drug Loading Content c EE = Encapsulation Efficiency Polydispersity：多分散性、均一性 微球特性 微球特征 姜黄素纳米微球的合成、形貌及粒径分布 A：姜黄素载药纳米微球的原子力显微镜照片 B：刚制备的姜黄素载药纳米微球电子显微镜照片 C：冻干后复溶姜黄素载药纳米微球的电子显微镜照片 微球特性 微球特征 相关表征的测定 载药纳米微球的粒径、表面电位、载药量、包封率测定 图6 姜黄素载药纳米微球体外释放曲线 微球特性 微球特征 第二部分：姜黄素纳米微球体外抗肿瘤效果评价 负载荧光素（香豆素-6）纳米微球与细胞（U251)共培养 a: DAPI染的细胞核; b:香豆素-6的荧光; c: DAPI和香豆素-6荧光的合成 姜黄素纳米微球体外抗肿瘤效果评价（MTT) Cur裸药和Cur纳米粒子对于U251细胞凋亡率的影响（P＜0.05）： A：为空白对照； B：为空白粒子对于U251细胞凋亡率； C、E:分别为30 μM 和60 μM 姜黄素对于U251细胞凋亡率； D、F:分别为30 μM 和60 μM 姜黄素纳米微球对于U251细胞凋亡率； 姜黄素纳米微球体外抗肿瘤效果评价（流式细胞仪检测） 姜黄素载药纳米微球及裸药姜黄素对于C6胶质瘤细胞的抑制效果以及抗氧化剂Vitanmin E对于其细胞杀伤效果的保护作用 载药纳米微球体外抗肿瘤效果评价 图6 不同药物作用下的胶质瘤细胞内ROS水平的变化 A对照； B空白纳米微球； C未经过Vitamin E处理的裸药姜黄素组； D经过Vitamin E处理的裸药姜黄素组； E未经过Vitamin E处理的姜黄素载药纳米微球组； F经过Vitamin E处理的裸药姜黄素载药纳米微球组。 载药纳米微球体外抗肿瘤效果评价  第三部分： 姜黄素纳