几种工业酶制剂-精品课培训稿.ppt

第九章 几种工业酶制剂;第一节 碳水化合物酶（一）; 一般α—淀粉酶在pH值为5.5—8.0时活性较稳定，pH值小于4时，酶易失去活性．但有些α—淀粉酶是偏酸性或偏碱性的，如黑曲酶生产的α—淀粉酶最适合的pH值为4，在pH值为2.5、温度为40℃时，处理30min后仍有一定的活性，但在pH值为7、温度为55℃，处理15min，α—淀粉酶几乎失活。而用米曲酶生产的α—淀粉酶则相反，在pH值为7、温度为55℃时，处理15min，酶活性无损失，但在pH值为2.5时，酶的活性完全消失。 目前所用的α—淀粉酶主要有耐中温(60—70℃)和耐高温(90-95℃)．根据酶反应动力学分析，温度每升高10℃，反应速度提高1—2倍，故耐高温。; 目前所用的α—淀粉酶主要有耐中温(60—70℃)和耐高温(90-95℃)．根据酶反应动力学分析，温度每升高10℃，反应速度提高1—2倍，故耐高温。 α—淀粉酶具有反应速度快、效率高、成本低等优势．α—淀粉酶是一种金属酶，Ca2+使α—淀粉酶保持适当的构象，从而维持其最大的活性和稳定性．除Ca2+外，其它二价碱金属离子Ba2+、Mg2+等也有维持α—淀粉酶活性的作用．耐中温α—淀粉酶为适应生产工艺的高温条件，有时需添加Ca2+等稳定剂，但耐高温α—淀粉酶在Ca2+浓度很低时，稳定性就很好。在实际使用时，不需添加Ca2+等稳定剂。;（二）真菌α—淀粉酶生产菌株诱变选育路线图谱 出发菌株～米曲霉2197 产酶148u/g ↓紫外线 突变株～米曲霉ZLA16 产酶324u/g ↓硫酸二乙酯 突变株～米曲霉ZLB35 产酶416u/g ↓钴60γ—射线 突变株～米曲霉ZLC06 产酶685u/g ↓微波 突变株～米曲霉ZLD14 产酶788u/g ↓亚硝酸 突变株～米曲霉ZLE09 产酶801u/g ↓离子束 突变株～米曲霉ZLF13 产酶946u/g;三、工业生产;2、液体深层发酵;二、葡萄糖淀粉酶（糖化酶）; 糖化酶是采用现代生物技术生产的生物制剂。产品最适作用PH4.0-4.2，适宜于PH范围PH3.5-5.0，最适作用温度58-60℃。存在于霉菌、细菌、酵母中。常用的生产菌是霉菌，如根霉、曲霉、拟内孢霉、黑曲霉、红曲霉等。是一种应用广泛、生产量最多和酶产品。用途：该产品广泛用于生产白油、黄酒、酒精、啤酒、乳酸钙作糖化剂；用于以葡萄糖作发酵培养基的各种抗生素，有机酸、氨基酸、维生素的发酵，还大量用于生产各种规格的葡萄糖。;（二）工业生产;根据水解底物专一性的不同，直接脱支酶可分为异淀粉酶和普鲁蓝酶两种。异淀粉酶只能水解支链结构中的α一1，6糖苷键，不能水解直链结构中的α—l，6糖苷键；普鲁蓝酶不仅能水解支链结构中的a一1，6糖苷键，也能水解直链结构中的α-1，6糖苷键，因此它能水解含α一1，6糖苷键的葡萄糖聚合物。 脱支酶在淀粉制糖工业上的主要应用是和β一淀粉酶或葡萄糖淀粉酶协同糖化，提高淀粉转化率，提高麦芽糖或葡萄糖得率。;;淀粉的酶液化和酶糖化工艺 ;2、 液化方法;2 ） 高温液化法;3 ） 喷射液化法;（二）、糖化; 双酶法生产葡萄糖工艺的现在水平，糖化2 d葡萄糖值达到95～98。在糖化的初阶段，速度快，第一天葡萄糖达到90以上，以后的糖化速度变慢。葡萄糖淀粉酶对于α一1，6糖苷键的水解速度慢。提高用酶量能加快糖化速度，但考虑到生产成本和复合反应，不能增加过多。降低浓度能提高糖化程度，但考虑到蒸发费用，浓度也不能降低过多，一般采用浓度约30％。 ;;2 糖化操作;; 达到最高的葡萄糖值以后，应当停止反应，否则，葡萄糖值趋向降低，这是因为葡萄糖发生复合反应，一部分葡萄糖又重新结合生成异麦芽糖等复合糖类。这种反应在较高的酶浓度和底物浓度的情况下更为显著。葡萄糖淀粉酶对于葡萄糖的复合反应具有催化作用。 糖化液在80℃，受热20 min，酶活力全部消失。实际上不必单独加热，脱色过 程中即达到这种目的。活性炭脱色一般是在80℃保持30 min，酶活力同时消失。;二、精制和浓缩;（一）过滤 过滤就是除去糖化液中的不溶性杂质，目前普遍使用板框过滤机，同时最好用硅藻土为助滤剂，来提高过滤速度，延长过滤周期，提高滤液澄清度。一般采用预涂层的办法，以保护滤布的毛细孔不被一些细小的胶体粒子堵塞。 为了提高过滤速率，糖液过滤时，要保持一定的温度，使其黏度下降，同时要正确地掌握过滤压力。因为滤饼具有可压缩性，其过滤速度与过滤压力差密切相关。但当超过一定的压力差后，继续增加压力，滤速也不会增加，反而会使滤布表面形成一层紧密的滤饼层，使过滤速度迅速下降。所以过滤压力应缓慢加大为好。不同的物料，使用不同的过