康氏木霉与酵母混合发酵处理稻草秸秆的研究.docVIP

康氏木霉与酵母混合发酵处理稻草秸秆的研究 　　摘要：利用康氏木霉与酵母混合发酵处理稻草秸秆，结果表明酵母菌和康氏木霉之间不仅无颉颃，且酵母菌能促进康氏木霉的生长；单因素试验确定混合发酵最适发酵时间为３ｄ，最适发酵温度为３０，最适ｐＨ值为４．５；正交试验得出酵母最佳添加量为７０％，酵母在第三天加入，尿素添加量为１％。发酵料蛋白含量可达１１．２１％，还原糖含量达到２５．４２％。 　　关键词：康氏木霉；混合发酵；正交试验；秸秆 　　中图分类号：Ｓ８１６．７９文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11407－1420-03 　　 　　Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｍｉｘｅｄ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ kｏｎｉｎｇｉｉ ａｎｄ Ｙｅａｓｔ ｆｏｒ Ｓｔｒａｗ 　　 　　ＳＨＩ Ｇｕｏ－ｃｕｉ，ＹＩＮ Ｗｅｎ－Ｘｉｎ，ＺＨＡＮＧ Ｍｉｎ 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ kｏｎｉｎｇｉｉ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｗｉｔｈ ｙｅａｓｔ ｔｏ ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ ｓｔｒａｗ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅｍ ａｎｄ ｙｅａｓｔ ｃｏｕｌｄ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ kｏｎｉｎｇｉｉ． Ｓｉｎｇｌｅ－ｆａｃｔｏｒ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｕｌｔｉｖａｔｅ ｔｉｍｅ ｗａｓ ３ ｄａｙｓ， ｔｈｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ３０ ａｎｄ ｔｈｅ ｐＨ ｗａｓ ４．５． Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｓｕｇａｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ ｍａｔｅｒｉａｌ ａｄｄｅｄ ｗｉｔｈ ｙｅａｓｔ ａｎｄ １％ ｕｒｅａ ｗｅｒｅ １１．２１％ ａｎｄ ２５．４２％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． ７０％ ｍａｙ ｂｅ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｙｅａｓｔ ａｎｄ ｂｅｔｔｅｒ ａｄｄｅｄ ａｔ ｔｈｅ ｔｈｉｒｄ ｄａｙ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ kｏｎｉｎｇｉｉ； ｍｉｘｅｄ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ； ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ； ｓｔｒａｗ 　　 　　目前我国秸秆饲料的研究与开发利用仍处于较低水平，秸秆微生物处理菌种单一，产品种类和数量少，产业化水平低，很难实现社会化、大规模的秸秆转化利用。当前秸秆饲料主要用于牛、羊等反刍动物和单胃草食动物的饲养，而且以软化和改变适口性为主，通过增加采食量来达到增加产量的目的，秸秆的营养价值改变较少［１］。 　　现在利用微生物发酵，一般都采用混合发酵。本文中利用康氏木霉与酵母混合菌发酵处理稻草秸秆，在混合发酵中，酶促作用生成的糖立即被发酵糖的微生物所利用，这样就维持了降解物的浓度，消除了酶合成作用受到降解物的阻遏作用，同时，也解除了反应终产物对酶的反馈抑制。所以，混合发酵的效果相对更好。 　　１试验材料与方法 　　１．１试验材料 　　１．１．１菌种康氏木霉和酵母菌均由本实验室筛选所得。 　　１．１．２培养基ＰＤＡ培养基：称取２００ ｇ马铃薯，洗净、去皮，切成小块，加水１ ０００ ｍＬ后煮沸３０ ｍｉｎ用纱布过滤，再加１０～２０ ｇ葡萄糖和１７～２０ ｇ琼脂。固体发酵培养基：６０％稻草，４０％麸皮，０．５％２ＳＯ４，０．３％ＫＨ２ＰＯ４，０．０６％ＣａＣｌ２，０．０５％ＭｇＳＯ４，微量ＦｅＳＯ４ ｇ马铃薯，洗净、去皮，切成小块，加水１ ０００ ｍＬ后煮沸３０ ｍｉｎ用纱布过滤，再加２０ ｇ葡萄糖。 　　以上培养基均于１２１下灭菌３０ ｍｉｎ。 　　１．２试验方法 　　１．２．１菌种扩大培养从斜面取酵母菌一环接种于酵母菌扩大培养基上，２８条件下，摇床２００ ｒ/ｍｉｎ培养４８ ｈ，为酵母菌一级种子。 　　将康氏木霉接种到ＰＤＡ培养基试管中，３０培养３ ｄ，向试管中滴加５ ｍＬ无菌水，振荡制备菌悬液。将菌悬液接种到固体发酵培养基中，３０下培养，每天搅拌１次，每次５ ｍｉｎ。 　　１．２．２菌种相容性试验将酵母菌倒于马铃薯培养基平板，接种康氏木霉于其上。另在一马铃薯培养基平板上接种康氏木霉菌种，作为对照。培养条件：２５，在恒温培养箱中培养。 　　１．２．３共发酵培养时间的确定先接入２０％康氏木霉培养后再接入２％酵母菌培养 ，以接种酵母后共发酵还原糖降到最低不再变化时作为发酵终点，此时蛋白含量不再变化。 　　１．２．４发酵温度的确定酵母菌接种后，分别置于２６、２８、３０、３２、３４、３６条件下培养。 　　１