哺乳动物精子顶体反应检测方法研究进展趋势.pptVIP

哺乳动物精子顶体反应检测方法研究进展; 顶体反应是指获能精子在穿越卵丘细胞与透明带之前或穿透这些结构期间，精子被激活，在很短的时间内顶体要发生一系列变化，从而导致顶体内容物释放，以溶解卵丘细胞和透明带，进而穿过透明带与卵细胞融合完成受精的过程。; 哺乳动物精子顶体是一个膜结合的帽状结构，它覆盖在精子核的前面。顶体由位于前面的顶体帽和位于后面的赤道板两部分组成。顶体的顶体隆起倒折形成顶脊， 顶体的下部与精子原生质膜的加厚部分( 核后帽) 相连接。顶体外面有胞膜，位于胞膜下的是顶体外膜 ( OAM) ，贴近核膜的是顶体内膜( IAM)。二膜之间的基质中含着精子完成受精过程所需要的水解酶和磷酸酯酶。 ;; 精子顶体反应检测时，就精子存在的状态而言，可概括为两类检测。一种是固定检测，这就是必然杀死精子，经染色处理后在显微镜下观察。???一种是活体检测，即精子在存活的状态下进行顶体反应测定。活体检测精子顶体反应，不仅可以分析精子群体AR 态，而且可判断精子是强烈的活动还是弱的活动。;;优点：这种方法简便、经济，在多种哺乳动 物间具有推广性。;凝聚素亲和荧光法;主要表现为 4 种类型: ① 整个精子都有荧光 － 死精子; ② 顶体区有荧光 － 顶体完整精子; ③ 顶体区和顶体后区均无荧光 － 表示全顶体破 裂，是早已完成 AR 者; ④ 顶体后段和赤道段有荧光 － 表示刚发生 AR 不久，顶体内容物尚未完全丢失。; ; 近年来，CTC 技术越来越受到人们的青睐，已广泛应用于哺乳动物和人 AR 机理研究中。目前检测顶体反应的方法还有电镜观察法。这一方法可仔细地检查顶体状态，包括顶体反应。虽然透射电镜法评价精子顶体反应费力又费时，但它仍然是目前常用的经典技术。;相差( 或干扰相差) 显微镜检测法 ;流式细胞仪检测法 ;;;谢谢观赏！