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28548 基因工程课程考试说明 一、课程使用教材、大纲 基因工程课程使用的教材为《基因工程》，龙敏南等编著，科学出版社，2010年版。 二、本课程的试卷题型结构及试题难易度 试卷题型结构表 课程代号 28458 课程名称 基因工程 题型 单选题 填空题 名词解释 简答题 论述题 合计 每题分值 1 1 3 5 10 题数 20 10 5 7 2 44 合计分值 20 10 15 35 20 100 2．试卷按识记、领会、简单应用、综合应用四个认知层次命制试题，四个认知层次在试卷中所占的比例大致分别为：识记占20％、领会占25%、简单应用占35％、综合应用占20％。 3．试卷难易程度大致可分为“容易、中等偏易、中等偏难、难”。根据课程的特点，每份试卷中，不同难易程度试题所占的分数比例大致依次为易占30分、中等偏易30分、中等偏难20分、难占20分。 三、各章内容分数的大致分布 章次 内容 分值 绪 论 基因工程概述 5分左右 第一章 核酸的制备 10分左右 第二章 基因工程工具酶 15分左右 第三章 基因工程克隆载体 10分左右 第四章 目的基因的分离与修饰 15分左右 第 五 章 重组基因导入受体细胞 15分左右 第六章 外源目的基因表达与调控 15分左右 第 七 章 基因组与改造 8分左右 第八章 基因工程应用 7分左右 合计 100分 四、各章内容的重、难点 章次 重点 难点 绪论 基因工程的定义、基因工程的理论基础 基因工程的技术基础 第一章核酸的制备 裂解细胞的方法、DNA分离和抽提的方法、PCR扩增特异性DNA片段的主要条件、琼脂糖凝胶电泳参数 核酸的酶法合成、核酸样品的凝胶电泳分析、核酸序列分析 第二章基因工程工具酶 限制性内切核酸酶作用机制、限制性内切核酸酶反应系统、限制性内切核酸酶切割DNA方法、DNA片段连接方法、耐热性DNA聚合酶 限制性内切核酸酶反应系统、限制性内切核酸酶切割DNA方法、限制性图谱的制作 第三章基因工程克隆载体 克隆载体DNA分子必须具备的基本条件、细菌质粒载体、入噬菌体克隆载体、cosmid载体 入噬菌体克隆载体构建的基本策略和路线 第四章目的基因的分离与修饰 原核生物基因组成、真核生物基因组文库的构建方法、cDNA基因文库的构建方法、利用聚合酶链式反应技术扩增目的基因 原核生物基因结构、真核生物基因结构、cDNA基因文库构建的步骤、 第五章重组基因导入受体细胞 受体细胞的选择原则、受体细胞的种类与特性、重组基因导入受体细胞的方法、重组子筛选的方法 重组基因导入受体细胞的方法、显色互补筛选法、核酸探针杂交分析 第六章外源目的基因表达与调控 避免外源基因表达蛋白降解的方法、基因表达的调控元件、大肠杆菌、酵母基因表达系统、外源基因表达产物的分离纯化 启动子与增强子的特性、大肠杆菌中高效表达基因策略、Westernblot印迹法 第七章基因组与改造 人类基因组计划、生物芯片、蛋白质组学、蛋白质工程、代谢工程 基因芯片、蛋白质分子改造方法、代谢工程原理方法与步骤 第八章基因工程应用 基因工程药物、基因治疗、转基因植物的种类、转基因动物 基因治疗、转基因动物作为生物反应器 五、各题型试题范例及解题要求 1.单项选择题（每小题1分，共20分） 解题要求：在下列每小题的四个备选答案中，选出一个正确答案，并将其字母标号填入题干的括号内。 范例：转化大肠杆菌的方法中，转化效率最高的是（ ） A.Ca2＋诱导大肠杆菌转化法 B.电穿孔转化法 C.三亲本杂交接合转化大肠杆菌 D.转化效率相同 解答：B 2.填空题（每小题1分，共10分） 解题要求：在下列每小题的空格中填入正确答案。 范例：DNA序列测定的方法主要有Sanger发明的DNA双脱氧链终止测序法和Maxam、Gilbert发明的 两种。 解答：化学降解测序法 3.名词解释（每小题3分，共15分） 解题要求：直接写出相关术语的涵义，不要展开说明。 范例：亚克隆 解答：将克隆片段进一步片段化后再次进行的克隆，（1分）一般将重组DNA分别用几种限制性核酸内切酶切割后，将所得各片段分别重组到载体上，再转化宿主细胞，通过对转化细胞的表型鉴定或其他方法来确定基因所在的位置。（2分） 4.简答题（每小题5分，共35分） 解题要求：简要回答相关问题要点，不用阐述。 范例：简述噬菌体表面展示技术。 解答：将外源DNA片段插入丝状噬菌体基因组的一个外被蛋白基因中，如果两者读码框结构保持一致，这个外源DNA片段所编码的，并显示在噬菌体的表面。（2分）利用抗此外源基因编码产物的抗体，通过亲和纯化，