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基因工程基础知识梳理一、DNA重组技术的基本工具基因工程又叫＿＿＿＿＿＿＿，指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和＿＿＿＿＿＿＿等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。其操作水平是在＿＿＿＿＿＿＿上进行设计和施工，操作环境是在生物体外。1．限制性核酸内切酶——“分子手术刀”（1）主要来源：＿＿＿＿＿生物。（2）特点：能够识别DNA特定的＿＿＿＿＿＿＿，切开两个核苷酸之间的＿＿＿＿＿。（3）DNA末端：限制酶切割DNA产生的DNA末端有两种形式：＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿。2．DNA连接酶——“分子缝合针”（1）作用：将双链＿＿＿“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的＿＿＿＿＿。（2）种类①：只能缝合DNA的＿＿＿＿＿＿。②：即可缝合DNA的黏性末端，又可缝合双链DNA的＿＿＿＿＿。3．基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”（1）载体的种类①最常用的是：是一种裸露、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有＿＿＿＿＿能力的＿＿＿＿＿。②＿＿＿＿＿的衍生物。③。（2）质粒载体的特点①能够在细胞内＿＿＿＿＿＿＿。②具有一个或多个＿＿＿＿＿＿＿，便于供外源DNA片段插入其中。③具有特殊的＿＿＿＿＿＿＿，供重组DNA的。（3）质粒载体的处理：真正被用作载体的质粒，都必须在天然质粒的基础上进行＿＿＿＿＿＿。二、基因工程的基本操作程序1．目的基因的获取（1）目的基因：指编码蛋白质的＿＿＿＿＿。（2）获取目的基因的方法①基因文库的含义：将含有某种生物不同基因的许多＿＿＿＿＿，导入＿＿＿＿＿的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。基因文库和种类（ⅰ）基因组文库：含有一种生物的＿＿＿＿＿基因（ⅱ）部分基因文库：含有一种生物的＿＿＿＿＿基因，如文库。c．目的基因的获取依据：（ⅰ）基因的＿＿＿＿＿序列；（ⅱ）基因的功能；（ⅲ）基因在染色体上的位置；（ⅳ）基因的＿＿＿＿＿产物mRNA；（ⅴ）基因的翻译产物蛋白质。②利用扩增目的基因a．本质：是一项在生物体外＿＿＿＿＿特定DNA片段的核酸合成技术。b．特点：①解旋；②＿＿＿＿＿酶。③需要。c．过程：目的基因受热形成＿＿＿，与结合，在＿＿＿＿＿的作用下延伸形成DNA。d．方式：指数扩增＝2n（n为扩增循环的次数）③法：若基因较、＿＿＿＿＿序列已知，可以人工合成。2．基因表达载体的构建（1）表达载体的组成：目的基因＋＿＿＿＿＿＋终止子＋标记基因。（2）表达载体的功能①使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且＿＿＿＿＿给下一代。②使目的基因＿＿＿＿＿和发挥作用。（3）启动子：位于基因的＿＿＿＿＿，它是＿＿＿＿＿识别和结合的部位，驱动基因转录产生mRNA。（4）终止子：位于基因的尾端，终止＿＿＿＿＿。（5）标记基因：＿＿＿＿＿是否含有目的基因。3．将目的基因导入受体细胞转化的含义：目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持＿＿＿＿＿的过程。（1）将目的基因导入植物细胞方法：①农杆菌转化法a．农杆菌特点：易感染＿＿＿＿＿植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有感染能力；Ti质粒的＿＿＿＿＿可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上。b．转化过程：目的基因插入＿＿＿＿＿→农杆菌→导入植物细胞→稳定维持和表达②基因枪法。③花粉管通道法。（2）将目的基因导入动物细胞①方法：＿＿＿＿＿注射技术。②操作程序：目的基因表达载体提纯→取卵（受精卵）→显微注射→＿＿＿＿＿→新性状的动物。（3）将目的基因导入微生物细胞①原核生物特点：繁殖快、多为＿＿＿＿＿、遗传物质少。②转化：＿＿＿处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合→促进细胞吸收DNA分子。4．目的基因的检测与鉴定（1分子水平a．检测转基因生物的＿＿＿＿＿上是否插入的，采用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技术。b．检测目的基因是否转录出了，采用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技术。c．检测目的基因是否翻译成，采用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技术。（2）个体水平鉴定：＿＿＿＿＿实验。三、基因工程的应用1．植物基因工程的成果提高农作物的＿＿＿＿＿能力、改良农作物的品质、利用植物生产＿＿＿＿＿等。（1）抗虫转基因植物①方法：将＿＿＿＿＿导入植物体，使其具有抗虫性。②成果：各种抗虫作物，如抗虫水稻、抗虫棉、抗虫玉米等。③意义：减少＿＿＿＿，降低生产成本，减少环境污染。④主要杀虫基因：＿＿＿＿＿、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等。（2）抗病转基因植物（3）抗逆转基因植物（4）利用转基因改良植物的品质2．动物基因工程的成果（1）提高动物的生长速度（2）改善畜产品的品质（3）转基因动物生产药物：药用蛋白基因＋乳腺蛋白基因的＿＿＿＿＿。（4）转基因动物作器官移植的供体①器官供体：抑制或除去＿＿＿＿＿。②成