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乙酰胆碱酯酶的研究进展强 内容概要 初识乙酰胆碱酯酶（AChE）分子 AChE单体的三维结构及相关生化反应 AChE的应用前景及对未来研究问题的展望 (一)初识乙酰胆碱酯酶（AChE）分子 1.AChE分子的简介 乙酰胆碱酯酶(AChE，EC 3.1.1.7)是生物神经传导中的一种关键酶。在神经传导中执行着重要的功能。该酶降解乙酰胆碱，终止神经递质对于突触后膜兴奋刺激作用，保证神经信号分子在生物体内正常的传导。 2.AChE分子的认识进展 科学家1986年首次从电鳐中克隆了AChE的cDNA 。这以后，随着各种科学技术的发展,使人们在分子水平上对AChE 有了深入的认识,并且推动了相关研究的发展。 3.AChE分子的分子形式 在生物体内AChE 存在6 种不同的分子形式：3 种为球形的，包括催化亚基单体(G1)、二聚体(G2)、四聚体(G4)；3 种胶原尾样亚基连接形成的不对称形式，包括四聚体(A4)、八聚体(A8)、十二聚体(A12)。 (二)AChE单体的三维结构及相关生化反应 1.AChE单体的形状与大小 AChE 单体为椭球形，大小为98nm ×79nm×3nm。催化中心位于球形分子表面形成的凹陷结构的底部，这个凹陷又称为峡谷。峡谷区大约深20 埃，宽14 埃，含有14 个高度保守的芳香族氨基酸残基 ，它们占据了峡谷表面积的60% 。 AChE单体及其活性峡谷 2.催化三联体 位于峡谷区的底部。 由3个残基Ser200、His447 和Glu199构成。 作用位点实际包括His447的咪唑基及Ser200的羟基。 具体作用机制 一个由丝氨酸的羟基构成的酸性作用点和一个有组氨酸的咪唑基通过构成的碱性作用点通过氢键结合，增强了丝氨酸羟基的亲核活性，使之易于与乙酰胆碱结合。 3.阴离子空洞 临近催化三联体区域。 由Gly21、Gly122 和Ala204 通过N-H键而形成的。 实际上其并不带电荷而是通过芳香族氨基酸残基的л电子与底物季铵阳离子的静电引力而使底物与酶结合的。 4.外周阴离子部位 位于峡谷的入口处。 由Trp286、Tyr72 和Tyr279构成。 具有结合并引导底物分子进入活性位点的功能。 5.收缩区域 如同瓶颈一般，将峡谷分为上下两 个部分。 由Tyr121和Phe330的侧链基团所构成。 与底物结合时收缩区域会相应扩大。 与结构密切相关的生化反应 1.乙酰胆碱与胆碱酯酶结合生成乙酰胆碱-酶复合物。 2.乙酰胆碱-酶复合物裂解成胆碱和乙酰化胆碱酯酶。 3.乙酰化胆碱酯酶迅速水解,分离出乙酸,酶的活性恢复。 (三）AChE的应用前景及对未来研究问题的展望 1.在临床医学中的应用 有研究者发现在动物细胞凋亡过程中会表达特异性的AChE，这为肿瘤等疾病的检测提供了新的思路。我们可以将细胞凋亡时表达的特异AChE 检测出来，建立1 个数据库。化验时便可通过AChE的 检测来判断疾病。 2.在环境检测上的应用 由于有机磷与氨基甲酸酯类农药是通过抑制AChE活性来发挥作用的，所以我们可以用基因克隆的方法制备大量的AChE，用以研究生物传感器，检测环境及农产品中相关农药的含量。 3.在农业上的应用 由于不同结构的AChE对有机磷等农药的敏感性不同，使得昆虫对这类农药具有不同的抗性，所以可以将昆虫中特异的AChE检测出来，以便对是否使用这类农药作出决策。 对未来研究问题的展望 研究表明，生物生存所需的AChE 的量仅占体内AChE 量的极少部分。那么其余的AChE 真的是生存所“非必需”的吗？莫非其还有其他的活性位点，这不禁为我们的研究带来了新的挑战！ 课题感悟 虽然AChE 的研究还存在一些问题，但我们不难想象，随着科技的发展，我们将会更加深入的了解AChE 的性质，并将其广泛地应用于农业、环保和医学等领域。 * * *