分子生物学第十二章__基因表达的调控.ppt

SP1 （四）反义RNA的调控作用 1.反义RNA对E.coli渗透压Pr.（外膜Pr.）的调控作用 细菌环境 omPRDNA omPRPr. omPCDNA 高渗 低渗 正控 变构 micFRNA 反义RNA （174个核苷酸） ompcmRNA 翻译 Ompc Pr.结合杂交双链 omPR Pr. 正控 转录 DNAomPF omPF DNA 转录 omPFmRNA micFmRNA 翻译 omPFmRNA omPFPr. （1）低渗→omPR Pr. omPF 。 omPC基因关闭。 （2）高渗—变构OmPR Pr. Ompc ompc mRNA ompc Pr. micF （3）micF能与ompF mRNA前导序列（L）中的44个核苷酸（包括SDs）及编码区（包括起始码AUG）形成杂合双链，从而抑制了ompF mRNA翻译。 （4）2种Pr.（ompF.ompc）随渗透压变化而变化此消彼长，总量不变。 （5）反义RNA—与mRNA反义，通过互补碱基与特定的mRNA结合，抑制mRNA的翻译，又称干扰mRNA的互补RNA,简称micRNA（mRNA-interfering complementary RNA）。 正控 正控 转录 翻译 同时转录 2.反义RNA对Tn10转位酶的调控作用 （1）Tn10带有terr，转座最大的特点是原位转座不动，仅将1个新的合成复本插到另1个新的位点上上去。 （2）Tn10的基本结构 IS Structral gene 3’ 反义（阻遏）RNA 5’（RNA-out） 5’ Pin（启动子） 3’ 5’ Pin启动转录 Tn10转位酶 （RNA-in） Pout 启动子 （RNA-out）阻遏RNA 3’ 5’ 3’ 5’ 互补 Tn10转位酶mRNA （3）调控机理 ①Tn10转位酶由pin控制，反义RNA基因由Pout控制。2启动子转录方向相反，在转录区有35（40）bp重叠，导致2条RNA互补。 ②2启动子交叉转录，产物RNA互补重叠成双股链→核糖体不能接触—转位酶不能译出→无酶无法转位。 ③只有RNA-in摆脱了RNA-out配对才有机会翻译。RNA-out活性较RNA-in大8倍，所以Tn10的份数越多，转座机会就越少。 ④生物学意义 对于细菌来说，Tn是入侵者，除抗生素抗性基因对细菌有利外，过多Tn对细菌是一个况重负担、甚至置细菌于死地（转座引起插入突变等）Tn10用反义RNA约束自己不要过多繁殖以免与宿主同归于尽。 第二节 真核生物基因表达的调控 真核生物基因调控远比原核生物复杂，人们对其了解尚处于探索阶段，单细胞真核生物如酵母和原核类似，主要通过及时调整酶系统基因表达以适应环境，获取营养外，而—— 绝大多数真核生物基因极少数与环境变化有直接或间接的关系，而与真核生物体生长发育，分化等生命现象息息相关。 其调控最大特点是遗传程序调控。 调控主要水平是转录水平。其次为转录后水平、DNA水平、翻译及翻译后水平等。 真核生物基因表达的特点： 真核生物的基因组比原核的基因大得多，如人类单倍体基因组为3 x 109bp，E. coli基因组为4 x 106 bp，二者相差700倍，但真核生物基因组中仅有约1%的基因表达为蛋白质。其特点： 1)部分基因在一个哺乳动物所有类型的细胞中都有表达，这些基因叫持家基因或叫组成型基因，另一些基因仅在某种细胞中表达，这些基因叫奢侈基因。 2)部分基因有生命过程中均不表达，叫沉默基因。此现象的存在是基因调控的结果。 3)基因的表达可以被诱导：如用高温反复处理植株，可诱导热激蛋白的表达，此为从无到有方式；乙烯处理植物诱导激酶的大量表达，此为少到多的诱导方式。 4)基因的表达具有时间性：真核生物在不同发育阶段顺次表达不同的蛋白，如胎儿血红蛋白为胎儿血红蛋白（ξ2ε2），成年期则变成血红蛋白（α2β2）。 5)基因的表达具有空间性：指部分基因在生物的不同部位表达，如与形成花瓣有关的基因仅在花器官中表达，不会在叶片中表达。 真核基因表达调控的特点： 与原核一样可分为转录水平的调控和转录后调控（包括RNA的加工，运输，翻译的调控等），也以转录水平的调控为主，与原核相比，真核生物表达的调控具有如下4个特点： 1)真核生物中染色质的结构对基因的表达有明显的调控作用。 真核生物染色质的组成单位是核小体，核小体的状态影响DNA的表