高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇的含量.docVIP

高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇的含量 　　摘要：采用高效液相色谱法测定了虎杖不同生长条件及不同部位的白藜芦醇含量。建立了以色谱柱为Ｚｏｒｂａｘ ＣＢ－Ｃ１８，流动相为甲醇－水，流速为０．８ ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长为３０６ ｎｍ，柱温为室温，进样量为８０ μＬ的高效液相色谱方法。结果表明，白藜芦醇浓度在２～１００ μｇ／ｍＬ范围内与峰面积积分值呈良好线性关系；平均回收率为９９．１％，ＲＳＤ＝１．２％。野生虎杖和组织培养虎杖白藜芦醇含量存在较大差异，虎杖不同部位白藜芦醇含量也存在较大差异，其中以野生虎杖根中白藜芦醇含量最高。虽然在不同培养条件下，虎杖的不同部位都含有白藜芦醇，但与野生虎杖根相比含量差距较大，不能代替野生虎杖根的药用价值。 　　关键词：虎杖；白藜芦醇；高效液相色谱法 　　中图分类号：Ｏ６５７．７＋２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11404－0825-03 　　 　　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ ｉｎ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｃｕｓｐｉｄａｔｕｍ ｂｙ ＨＰＬＣ 　　 　　ＸＩＡ Ｈａｉ－ｗｕ，ＴＡＮ Ｚｈｉ－ｊｉｎｇ，ＭＩＡＯ Ｙｏｎｇ－ｍｅｉ，ＤＥＮＧ Ｄｕｎ 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｗｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔ ｏｆ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｃｕｓｐｉｄａｔｕｍ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ． Ｔｈｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｏｎ Ｚｏｒｂａｘ ＣＢ－Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎ ｉｎ ｍｅｔｈａｎｏｌ－ｗａｔｅｒ ｗｉｔｈ the ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ ０．８ ｍＬ／ｍｉｎ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ａｔ ３０６ ｎｍ ｉｎ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｆｔｅｒ ｉｎｊｅｃｔing ８０ μＬ ｓａｍｐｌｅ． Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ ｗａｓ ２～１００ μｇ／ｍＬ ｗｉｔｈ an ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ９９．１％ ． Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ in ｗｉｌｄ ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｃｕｓｐｉｄａｔｕｍ ｗｅｒｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ， ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ ｏｆ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｃｕｓｐｉｄａｔｕｍ ａｌｓｏ ｖａｒｉｅｄ． Ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ ｉｎ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｃｕｓｐｉｄａｔｕｍ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ in wild plants． Ｔｈｏｕｇｈ ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ ｏｆ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｃｕｓｐｉｄａｔｕｍ ｄｉｆｆｅｒｅd ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ， ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ content was detected ｉｎ ｔｈｅ ｒｏｏｔｓ ｏｆ ｗｉｌｄ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｃｕｓｐｉｄａｔｕｍ， ｗｈｉｃｈ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍｅｄｉｃａｌ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｗｉｌｄ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｃｕｓｐｉｄａｔｕｍ ｗａｓ ｉｒｒｅｐｌａｃｅａｂｌｅ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｃｕｓｐｉｄａｔｕｍ； ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ； ＨＰＬＣ 　　 　　白藜芦醇又称芪三酚，现代药理研究证明：白藜芦醇具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗炎、抗自由基、保护肝脏、保护心血管和抗心肌缺血、免疫调节、降血糖、降血脂等作用［１，２］。另外白藜芦醇还有抗衰老、皮肤保健和美容功效［３，４］。朱鸿津采用ＨＰＬＣ法测定虎杖中白藜芦醇含量，测定结果表明，虎杖根中白藜芦醇含量可高达千分之一，可作为白藜芦醇的提取原料［５］。然而，由于虎杖根的野生资源有限，大量采挖使野生资源日趋减少，近年来有一些利用组织培养快速繁殖虎杖的报道。文涛等［6］测定发现虎杖愈伤组织中也含有白藜芦醇，并对虎杖不同部位白藜芦醇含量进行分析，结果发现虎杖根、茎、叶中均含有白藜芦醇，其中多年生根中含量最高［７］。综上所述，虎杖不同生长条件、不同部位均含有白藜芦醇。准确测定虎杖不同生长条件及不同部位白藜芦醇含量，将为虎杖资源进一步开发利用提供参考。 　　１材料与方法 　　１．１仪器与材料 　　高效液相色谱仪检测站；Ｚｏｒｂａｘ ＣＢ－Ｃ１８色谱柱；Ｇｚｘ－９１４６ ＭＢＥ数显鼓风干燥箱；ＴＧＬ－１６Ｇ台式高速离心机；Ｗ２０１Ｄ恒温水浴锅、申科Ｒ－２０５旋转蒸发器；ＳＨＢ－Ⅲ循环水式多用真