第四章遗传信息的转录应用.ppt

* 类型 细胞内定位 催化转录产物 对鹅膏蕈碱的反应 Ⅰ 核仁 转录rRNA前体 不敏感 Ⅱ 核质 转录mRNA前体和snRNA 低浓度敏感 Ⅲ 核质 转录5SrRNA tRNA 高浓度敏感 2. 真核生物RNA聚合酶 * α-Amanitin(鹅膏蕈碱) :是一种来自毒蘑菇鬼笔鹅蕈(Amanita phalloides)的真菌毒素，二环八肽，能抑制真核RNA聚合酶Ⅱ与RNA聚合酶Ⅲ转录。 * 第二节 启动子与转录的起始 一、启动子的基本结构 启动子是一段位于结构基因5’端上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。 * 描述碱基位置时，一般用数字表示， 1 -30 -50 10 -10 -40 -20 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? * +1碱基：起始位点 -10区：一致性序列为TATAAT又叫Pribnow盒是RNA聚合酶的结合位点 -35区：一致性序列为TTGACA是RNA聚合酶的识别位点 1. 原核生物启动子结构 RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 * 开始转录 T T G A C A A A C T G T -35 区 ( Pribnow box ) T A T A A T Pu A T A T T A Py -10 区 1 -30 -50 10 -10 -40 -20 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 原核生物启动子保守序列 5? 5? RNA聚合酶保护区 结构基因 3? 3? 富含A和T UP元件 -60 ( Sextana box ) * 2. 真核生物启动子 * 二、转录的起始 启动子区的识别 原核生物基因转录的起始 * 转录泡 * 不依赖ρ因子的终止 依赖ρ因子的终止子 第三节 转录终止 * 1. 非依赖 ?因子的转录终止 DNA 模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出 RNA 后，RNA 产物形成特殊的结构来终止转录。 转录产物的3′末端常有多个连续的U，连续的U区5′端上游的一级结构，接近终止区的一段碱基可形成鼓槌状的茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构形式的二级结构，这是非依赖 ?因子的转录终止的普遍现象。 * 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` RNA 5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3? DNA UUUU...… UUUU...… 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 接近终止区的一段碱基形成鼓槌状的茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构形式的二级结构，是普遍现象。 * 用T4噬菌体DNA在试管内进行转录实验，转录产物比在细胞内转录出的要长。说明： 2. 依赖 ? 因子的转录终止 ①转录终止信号是可以跨越的； ②细胞内某些因素有执行转录终止的功能。 据此，1969年, J. Roberts 发现了能控制转录终止的蛋白质，定名为?因子。 * * 三、抗终止 在转录过程中有时即使遇到终止信号，却仍然需要继续转录，于是出现了抗终止现象。 * 第四节 转录后的加工 * 1. 5’ 端加帽 mRNA的前体：核内不均一RNA（hnRNA） 一、mRNA的加工 * 2. 3’ 端加尾 * 3. mRNA中段序列的剪接 * 二、rRNA前体的转录后加工 三、tRNA前体的转录后加工 * 四、核酶的作用特点及方式 至今，已发现了数十种具有催化活性的不同的RNA酶。 只有RNA组分单独具有催化活性时，此RNA才属于核酶。 核酶RNA首先在细胞核中发现，并主要存在于胞核中，但在胞质以及病毒和类病毒中也逐渐有所发现。 * 剪切型 剪接型 2. 核酶的作用方式 1. 核酶的作用特点 作用底物比较单纯 催化效率较酶蛋白一般都低得多 催化的反应必须有Mg2+存在时才能进行 也表现一定的特异性 * 五、RNA的剪接、编辑和再编码 RNA的剪接更多的发生于真核生物基因组内,特别是真核生物基因的内含子被转录后。 RNA的编辑是RNA分子上一种转录后修饰现象，包括插入、缺失或核苷酸的替换。 mRNA在某些情况下可以不