生物代谢与生物制剂开发.ppt

生物代谢与生物制剂的开发 主讲：杨基先 0451yanghit27@163.com yangxj@ 一、概述 环境问题与环境污染 环境生物制剂的开发 环境生物制剂的应用 一、概述 2006年6月3日的滇池 生物与环境关系的基本原理 生物与环境关系的基本原理 淮河流域水污染 环境生物制剂的开发 环境生物制剂(environment biological preparation)是指以生物学、环境学、生态学、化学等多学科理论为基础，以监测、改善环境状况和强化处理系统稳定、高效为目标，通过菌群构建等科学方法得到的具有特殊功能的生物制品。 环境生物制剂的开发大致包括高效菌种的获得（富集、筛选、驯化、诱变、基因重组、细胞融合等方法）， 生产工艺（生产条件和产品提取）及工程应用。 环境生物制剂的应用 在废水处理中的应用 在空气污染控制中的应用 在固体废物处理与资源化中的应用 在生物修复中的应用 二、环境生物制剂开发的基本方法 环境生物制剂特点及其研究要求 环境生物制剂的研究方法 微生物的生理学原理 微生物的生态学原理 环境生物制剂特点及其研究要求 环境生物制剂的特点 环境生物制剂特点及其研究要求 环境生物添加剂、生物吸附剂、微生物絮凝剂、 生物催化剂、生物破乳剂、微生物肥料、 生物修复制剂、有效微生物菌群（EM）等 环境生物制剂特点及其研究要求 对菌种的要求： 1.菌种为纯种并具有稳定的遗传性； 2.必须能长出营养细胞、孢子或其他可再生单位； 3.能迅速旺盛地生长； 4.能在短时间内产生大量目的产物，产物易于分离。 培养条件： 1.分离与培养在无菌条件下进行； 2.选择适宜的培养基 研究过程：上游工程、下游工程 和工程应用， 获得高效菌种的手段：菌种的富集、筛选、纯化、诱变育种、基因重组、细胞融合等。 在工程应用中，环境生物制剂能否发挥最大的功效是其检验标准、投加方式、次数、投加量、环境条件等等，均需要从微生物生理生态学角度加以深入研究。 二、环境生物制剂开发的基本方法 目的菌的富集培养 富集培养的一般操作方法 厌氧微生物的富集培养 土壤环流法 选择培养基法 二、环境生物制剂开发的基本方法 直接筛选 高效菌群 (1)分离筛选的原则与方法 确定目标 选择分离源 确定筛选条件：选择培养基、培养条件、对毒物和抗菌素的抗性。 (2)各类微生物的分离与计数 (3)特定微生物的分离培养 纯化分离菌种  从自然界或其它不同途径分离筛选得到的微生物，首先要经过纯种分离。浓厚培养基中得到的菌种，接入固体培养基后生长出来的一些首批菌落，即便是一个单菌落也不能认为是纯的菌种。所以，还要把已分离好的菌落制成悬浊液，取其一部分在无菌稀释液中做一次培养，在培养皿上再次观察，以检测其纯化程度。如有必要，还要做一系列的稀释培养，连续进行单孢子分离，以得到纯种的微生物。 二、环境生物制剂开发的基本方法 诱变育种 出发菌株的选择 诱变剂的选择 诱变剂量的选择 突变体的筛选 二、环境生物制剂开发的基本方法 构建基因工程菌 基因工程(genetic engineering),是指用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体(Vector)的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中，以让外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达，从而获得新物种的一种崭新技术。 二、环境生物制剂开发的基本方法 基因工程的基本操作过程： 目的基因的获取 载体的选择 目的基因与载体DNA的体外重组 重组DNA分子进入受体细胞 筛选优良菌种 将目的基因克隆到表达载体上 二、环境生物制剂开发的基本方法 固定化微生物技术 固定化技术是指通过物理、化学手段将单一或混合的游离细胞或酶固定在特定的载体上，使其保持活性并可反复利用的一项生物工程技术。  二、环境生物制剂开发的基本方法 固定化微生物技术中载体的选择 经常采用的生物固定化方法主要有：载体结合法、包埋法、交联法和共价结合法 二、环境生物制剂开发的基本方法 微生物生理学的本质就是研究有机体的化学组成、性质、存在形式、结构和功能与微生物生命活动之间的关系，以及微生物生命活动过程中的化学变化规律。 二、环境生物制剂开发的基本方法 微生物的营养及营养成分 微生物吸收和利用营养物质的过程称为营养 微生物生态学原理 1.生态条件 2.种间关系 3.群落结构 三、高效工程菌的构建 高效工程菌构建