蛋白质化学教学稿件.ppt

# 属蛋白质类，由基因工程法生产 大多是数十年研究的多肽激素 一、 蛋白质的结构层次的划分 二、 蛋白质的一级结构 三、 多肽主链折叠的空间限制和 维持蛋白质构象的作用力 四、 蛋白质的二级结构 五、 蛋白质的超二级结构和结构域 六、 蛋白质的三级结构 七、 蛋白质的四级结构 第四节 蛋白质的分子结构 蛋白质分子是由一条或多条多肽链按照各自的特殊方式组合成的具有完整生物活性的生物大分子。 蛋白质与多肽无严格的界线，通常将分子量在6000道尔顿以上的多肽称为蛋白质。蛋白质分子量变化范围很大, 从大约6000到1000000道尔顿甚至更大。 蛋白质的结构有不同的层次，人为地分为1－4级结构。 一、 蛋白质结构层次的划分 蛋白质结构的主要层次 一级结构 四级结构 二级结构 三级结构 primary structure secondary structure Tertiary structure quariernary structure 超二级结构 结构域 supersecondary structure Structure doman 蛋白质不同结构层次的相互关系 二、蛋白质的一级结构 ? 定义：蛋白质的一级结构（Primary structure）又称为共价结构或化学结构。1969年，国际纯化学与应用化学委员会（IUPAC）规定蛋白质的一级结构指蛋白质多肽链中AA的排列顺序，包括二硫键的位置。 ? 是蛋白质最基本的结构，其中最重要的是多肽链的氨基酸顺序，它是蛋白质生物功能的基础，它包含着决定蛋白质高级结构和生物功能的信息。 牛胰岛素的一级结构 结构： 1、由51个AA组成，分子量5734。 2、由A、B两条链组成，A链21个AA,B链30个AA。 3、两链间有两对二硫键（7－7）（20－19） A链具有链内环（6－11）。 ?蛋白质的一级结构研究 一级结构的研究包括：蛋白质的氨基酸组成测定，肽链数目的确定，末端氨基酸种类测定，氨基酸的排列顺序测定，二硫键位置的测定，酰胺位置的确定。大致步骤如下： 1.获取一定量纯的蛋白质样品，测其分子量，然后将样品完全水解，确定该蛋白质的氨基酸种类、数目及每种氨基酸的含量。 2.进行末端测定，确定该蛋白质的肽链数目，N-端和C-端是什么氨基酸。 N-末端测定法：常采用2，4—二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。 C-末端测定法：常采用肼解法、羧肽酶法。 3.肽链的拆分:经末端的分析，若该蛋白质含有两条以上的肽链，而且肽链之间是通过非共价键连接，使用蛋白质变性剂将其变性后分开；若蛋白质肽链之间通过共价键相连，则可采取过甲酸氧化法或巯基乙醇还原法将其分开。 4.各肽链中氨基酸排列顺序的测定:使用两种以上的方法将肽链部分水解成肽段，测各肽段的氨基酸顺序，然后使用片段重叠法推测出完整肽链的氨基酸顺序。 5.确定二硫键和酰胺的位置 将肽段顺序进行叠联以确定完整的顺序 将肽段分离并测出顺序 专一性裂解 末端氨基酸测定 二硫键拆开 纯蛋白质 定义： 称为蛋白质的高级结构或构象，是以一级结构为基础，蛋白质分子中原子或基团在三维空间上的排列、分布和走向。包括 2－4级结构。 三、蛋白质的空间结构 蛋白质的一、二、三、四级结构 构型：是指在立体异构体之间，原子或基团在空间的取向（不同排布方式）。 特点：是一种二维变化；构型之间的相互转变涉及到共价键的形成与破坏，与氢键无关。 构象：是表示一个分子结构中（多肽）各原子或基团之间相互立体关系（一切原子或基团沿共价键转动而产生的不同空间排列）。 特点：是一种三维空间的变化；构象之间的转变是通过键的旋转或扭曲来完成的，涉及到氢键等次级键的形成和破坏。但不改变共价键。 ? 构型与构象 共价键 a.盐键 b.氢键 c.疏水键 d.范得华力 e.二硫键 维持蛋白质分子构象的作用力 肽键 二硫键 盐键 氢键 疏水键 非共价键 范德华力 定义：指多肽链在一级结构的基础上，按照一定的方式有规律的折叠和盘绕形成的特定空间构象。其实质是多肽链在空间的排列方式。 特点：只涉及肽链主链的构象及链内或链间形成的氢键，氢键是稳定二级结构的主要作用力。 类型：天然蛋白质二级结构一般有?-螺旋、?-折叠、?-转角、自由回转 四、蛋白质的二级结构 特征：1、 每隔3.6个AA残基螺旋上升一圈，螺距0.54nm; 2 、 螺旋体中所有氨基酸残基R侧链都伸向外侧，链中的全部C=0 和N-H几乎都平行于螺旋轴; 3、每个氨基酸残基的N-H与