[生物学]免疫14.pptVIP

细胞分离基本原理 不同细胞密度不同 不同细胞表面生物学特性不同 不同细胞表面分化抗原不同 沉降速度＝2r2(Q-Q0)g/gθη r：细胞半径 Q：细胞比重 Q0：介质比重 g：离心力 θ：形状因子，即细胞与等体积的标准颗粒的摩擦系数的比值 η：介质的绝对黏度 二 、淋巴细胞分离 贴壁粘附法 吸附柱过滤法 磁铁吸引法 Percoll 分离液法 （连续密度梯度离心） 三、T细胞和B细胞的分离 E花环沉降法 尼龙毛柱分离法 四、T细胞亚群的分离 亲和板结合分离法 磁性微球分离法 荧光激活细胞分离仪分离法 阳性选择法：根据细胞的标志进行选择纯化得到所需要的细胞。 阴性选择法：选择性去除不需要的细胞，仅留下所需要的细胞。 第二节 淋巴细胞标志及亚群分类 常用于鉴定和检测淋巴细胞表面标志是簇分化抗原（Cluster of differentiation，CD）。 表面标志亚群：通过一个或几个CD抗原定义出来的细胞亚群 一、T细胞表面标志及其亚群 T细胞表面主要的CD抗原有： CD2（又称为绵羊红细胞受体） CD3 CD4／CD8 CTLA－4（CD152）和CD28 CD40L 其他：致有丝分裂受体、病毒受体 一、T细胞表面标志及其亚群 CD3+CD4+CD8-辅助性T细胞（help T cell,Th） Th1：CD3+CD4+CD30- 分泌IL－2、IFN－γ和TNF－β Th2：CD3+CD4+CD30＋ 分泌IL－4、IL－5、IL－6、IL－10 CD3+CD4-CD8+细胞毒性T细胞（cytotoxic T cell,Tc or CTL） Tc1：CD3＋CD8＋CD30－ Tc2：CD3＋CD8＋CD30＋ CD4+CD25+调节性T细胞 （regulatory T cell,Tr or Treg） 二、B细胞表面标志 SmIg、CD32（Fc受体）、CD35（补体受体）、CD21（EB病毒受体）、CD40、CD80／CD86、 CD19/CD5分子：可将B细胞区分为B1细胞和B2细胞，B1细胞为CD19和CD5双阳性，而B2细胞仅为CD19阳性，B2细胞为通常所指的B细胞。 第三节 其他的免疫细胞 抗原提呈类细胞表面标志 单核－吞噬细胞系统（mononuclear phagocyte system,MPS）包括骨髓内的前单核细胞（pre-monocyte）、外周血中的单核细胞（monocyte）和组织内的巨噬细胞（macrophage）。 其表面标志是CD14 树突状细胞（dendritic cell,DC）：CD1a、CD11c和CD83 第四节 免疫细胞表面标志的检测及应用 免疫细胞表面标志的检测方法 淋巴细胞表面标志检测的临床意义 一、免疫细胞表面标志的检测 抗体致敏细胞花环法 免疫细胞化学法 免疫荧光法 流式细胞分析法 二、淋巴细胞表面标志检测的临床意义 淋巴细胞表面标志检测是评价免疫功能的重要指标。 对CD4+和CD8+T细胞的测定，有助于免疫缺陷疾病、自身免疫性疾病和移植排斥反应的监测。 思考题 1.免疫细胞都包括哪些细胞？为什么要将其分离纯化？ 2.淋巴细胞有哪几类细胞？能用形态学的方法加以区别吗？ 3.将细胞分离的原理有哪些？各有什么特点？ 4.形态学相同的一类细胞为什么还要分亚群？ 5.T细胞和B细胞进一步区分亚群的依据是什么？ 6.什么是细胞表面标志？其作用是什么？ 7.细胞表面标志的检测方法有哪些？ 8.利用细胞表面标志（CD抗原）分离细胞的方法有哪几种？ 9.T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞的主要生物标志是什么？ 10.淋巴细胞表面标志检测的临床意义是什么？ 重点 免疫细胞分离方法 淋巴细胞表面标志 名词：表面标志亚群 选择题 1.用抗人CD3单克隆抗体检测T淋巴细胞，其结果代表（） A.T淋巴细胞总数 B.Th细胞数 C.Tc细胞数 D.CD4+T细胞数 E.CD8+T细胞数 2.淋巴细胞分离法中的贴壁黏附法是利用单核细胞的如下特点（） A.体积不同特点 B.形态不同特点 C.贴壁生长特点 D.比重不同特点 E.抗原不同特点 3.不能从单个核细胞中去除单核细胞的方法是（） A.黏附贴壁法 B.离心法 C.吸附柱过滤法 D.磁铁吸引法 E.亲和板结合法 三、NK细胞表面标志 CD3－CD16＋CD56＋ 临床常见疾病中的T 淋巴细胞的变化 * * 第十四章 免疫细胞分离及其表面标志检测技术 免疫细胞是指参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞， 主要包括淋巴细胞、 单核巨噬细胞、 树突状细胞、 各种粒细胞、 红细胞和