[高二理化生]专题1 基因工程.pptVIP

（1）限制酶???  ①分布： ②作用特点: ?? ③结果： ??? ④举例：??? 限制酶的识别特点 以中轴线双侧的DNA上碱基呈反向对称，重复排列 如：GAA TTC CCC GGG CTT AAG GGG CCC （2）DNA连接酶???  ①连接的部位：磷酸和脱氧核糖之间的键： 磷酸二酯键（梯子的扶手或骨架） ②结果：两个相同的未端的连接。 ③分类：E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 ?? （3）运载体???  ①作用： ②具备的条件： ③举例：??? 第一步：获取目的基因 1.从基因文库中获取目的基因。 基因文库的构建模式图 第一步：获取目的基因 1.从基因文库中获取目的基因。 2.利用PCR技术合成DNA 第二步： 基因表达载体的构建 总结：表达载体需由哪几部分组成 复制原点 启动子 目的基因 终止子 标记基因 第三步：将目的基因导入受体细胞 将目的基因导入植物细胞： 将目的基因导入动物细胞： 将目的基因导入微生物细胞： 1、3 基因工程的应用 1、4蛋白质工程的崛起 蛋白质工程的概念 是研究蛋白质的结构及结构与功能的关系，然后人为地设计一个新蛋白质，并按这个设计的蛋白质结构去改变其基因结构，从而产生新的蛋白质。 或者从蛋白质结构与功能的关系出发，定向地改造天然蛋白质的结构，特别是对功能基因的修饰，也可以制造新型的蛋白质。 一、蛋白质的改造 干扰素在体外保存困难 玉米中赖氨酸含量比较低 二、蛋白质工程的基本原理 蛋白质工程的途径 讨论：某多肽链的一段氨基酸序列是： …—丙氨酸—色氨酸—赖氨酸—甲硫氨酸—苯 丙氨酸—… （1） 怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？请把相应的碱基序列写出来。有多少种？ （2） 确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因（DNA）？ （1） 怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？请把相应的碱基序列写出来。有多少种？ （2） 确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因（DNA）？ 蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程的不同 基因工程是遵循中心法则， 从DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能， 生产出自然界已有的蛋白质。 蛋白质工程是：确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→应有的氨基酸序列→应有的碱基排列， 创造自然界不存在的蛋白质。 蛋白质工程的进展和前景 1、蛋白质工程的诞生是有其理论与技术条件的，它是随着分子生物学、晶体学以及计算机技术的发展而诞生的，与基因组学、蛋白质组学、生物信息学的发展等因素有关 2、现状：成功的例子不多，主要是因为蛋白质发挥其功能需要依赖于正确的空间结构，而科学家目前对大多数蛋白质的空间结构了解很少。 DNA分子杂交技术 基因探针：核酸分子探针是指特定的已知核酸片段，能与互补核酸序列退火杂交，用于对待测核酸样品中特定基因顺序的探测。 满足：（1）必须是单链，（2）带有容易被检测出来的标记物。 酶工程简介 酶工程就是指将酶所具有的生物催化作用，借助工程学的手段，应用于生产、生活、医疗诊断和环境保护等方面的一门科学技术。由酶制剂的生产和应用两方面组成的。 第三步：将目的基因导入受体细胞 2、将目的基因导入动物细胞： （1）方法： （3）流程： （2）受体细胞： 显微注射法 动物细胞的受精卵（全能性） 目的基因的表达载体提纯 取卵（受精卵） 显微注射 受精卵发育 新性状的动物 第三步：将目的基因导入受体细胞 3、将目的基因导入微生物细胞： （1）受体细胞： （2）方法流程： 原核生物（常用大肠杆菌） 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。 理由： Ca2+处理受体细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子。 第四步：目的基因的检测与鉴定 检测与鉴定环节和方法： 第四步：目的基因的检测与鉴定 检测与鉴定环节和方法： 1、导入检测： 检测对象： 检测方法： 目的基因 DNA分子杂交技术 检测工具： 基因探针 带有标记（同位素标记或荧光分子标记）的目的基因的一条链。 2、表达检测 第四步：目的基因的检测与鉴定 检测与鉴定环节和方法： 转录检测 翻译检测 检测对象 检测方法 检测工