[高考]微生物培养技术.pptVIP

专题一 微生物培养技术 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。 自养型: 异养型: 腐生菌 寄生菌 选择培养基 （三）接种技术（课本第2页） 二、培养基对微生物的选择作用 三、测定微生物的数量 （一）、基础知识 1、纤维素与纤维素酶 【案例】分解纤维素的微生物的分离 纤维素是一种多糖 纤维素酶是一种复合酶 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 C1酶、Cx酶 葡萄糖苷酶 （二）、筛选 1、方法： 刚果红染色法 原理：刚果红（CR）可以与纤维素形成红 色复合物，当纤维素被纤维素酶分 解后，红色复合物无法形成，出现 以纤维素分解菌为中心的透明圈， 我们可以通过是否产生透明圈来筛 选纤维素分解菌。 常用的刚果红染色法有两种 方法一：在长出菌落的培养基上，覆盖1mg/mL的CR 溶液，10—15min后，倒去CR溶液，加入 1mol/L的NaCl溶液，15min后倒掉NaCl溶液。 方法二：配制质量浓度为10mg/mL的CR溶液，灭菌 后，按照每200mL培养基加入1mL的比例加入 CR溶液，混匀后倒平板。 一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红 （1）土壤取样 （2）选择培养（可省略） （3）梯度稀释 （4）涂布培养 （5）挑选产生透明圈的菌落 （6）微生物培养（纯培养） （三）、实验流程 * * 微生物 非细胞生物：病毒 原核生物：细菌、放线菌、支原体、 立克次氏体 真核生物：真菌（酵母菌、霉菌） 光合自养型:光合细菌 化能自养型:硝化细菌 一、微生物的分离和纯培养 （3项技术1个案例） （一）培养基配制技术 （二）无菌技术 （三）接种技术 案例：大肠杆菌的分离和纯培养 1、培养基定义：（课本第2页） 2、营养构成： 环境条件：pH、氧气、二氧化碳、渗透压等 （一）培养基配制技术 营养成分：水、无机盐、碳源、氮源、生长因子 固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等 半固体培养基可观察微生物的运动 液体培养基常用于发酵工业。 （1）按物理状态分： 固体培养基和液体培养基、半固体培养基。 3.培养基的分类 固体培养基 平板培养基（课本第2页） 斜面培养基 固体培养基中需加入凝固剂，如琼脂 半固体培养基 无运动 有运动 半固体培养基中也需要加入凝固剂琼脂，但加入量少于固体培养基。 液体培养基 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 （2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基 加入青霉素的培养基:抑制细菌和放线菌的生长， 分离酵母菌、霉菌等真菌。 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 定义（课本第7页） 举例： 加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同种类的微生物。 例如：在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来 鉴别大肠杆菌。 如果有大肠杆菌，其代谢产物就与伊红和美蓝 结合，使菌落呈蓝紫色，并带有金属光泽。 (课本15页) 用化学成分已知的化学物质配成的，因成分明确，常用于分类、鉴定等 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。 合成培养基: 天然培养基： （3）按成分分：合成培养基和天然培养基 用化学成分不明确的天然物质配成的，如血清、组织提取液等 称量：准确地称取各种成分。牛肉膏比较黏稠， 可以用玻棒挑取，放在称量纸上称量。牛 肉膏和蛋白胨都容易吸潮，称量时动作要 迅速，称后要及时盖上瓶盖。 4.培养基的配制步骤（第8页） （1）.计算:根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的 比例，计算配制100mL的培养基 时，各种成分的用量。 （参考课本83页培养基配方） （以牛肉膏蛋白胨固体培养基