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教学课件医学学院应用教学课件
基于RNA-seq技术的玉米CMS-C花药可变剪接和新转录本的研究;内容;1 文献综述;1.1 植物雄性不育;;
基因表达调控是植物发生雄性不育的重要影响因素。
Twell D等利用cDNA差别显示等分子生物学方法,己鉴定出花粉或花药特异基因。
曹家树等用mRNA差别显示技术。
Erickon等限制性内切酶酶切方法分析pol胞质和cam胞质的mtDNA,杂种后代分析。
袁美等利用Northen对波里马细胞质雄性不育三系线粒体RNA检测,发现3个探针atp6、orf224和orf222。
Leving S对玉米、Kadowaki对水稻的cpDNA酶切后电泳未发现不育系与保持系之间存在多态性。;1. 3 高通量测序(RNA-Seq )技术;1. 4 可变剪接;1.4.1 可变剪接类型;在生物体内,主要存在7种可变剪接类型:
A)Exon skipping;
B)Intron retention;
C) Alterna tive 5 splice site;
D) Alternative 3 splice site;
E) Alternative first exon;
F) Alternative last exon;
G) Mutually exclusive exon. ;1.4.2 中心法则与可??剪接;图 1-4 前体 mRNA 的构成性剪接和可变剪接事件;芯片技术:剪接连接点芯片技术和外显子芯片技术
寡核苷酸探针固定在玻璃片,每组探针都和特定的外显子或剪接位点对应,原理如图1-11;1. 5 新转录本;2 课题研究的目的及意义;3 材料与方法;3.2.2 Clean Reads数据的获得及信息分析 ;测序评估;3.3 可变剪接分析;3.3.2 可变剪接序列特征与机制分析;3.3.3 可变剪接事件分析;3.3.4 雄性不育相关可变剪接分析;3.4 新转录本分析;3.5 RT-PCR验证新转录本和可变剪接;3.6 qRT-PCR验证可变剪接事件;4 预期结果;5 进度安排;Thank You !
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