11蝴蝶兰组织培养.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 文心兰 1.茎尖培养 从母株上切取茎尖进行表面消毒,再切割0.5-1㎜大小的茎尖接种在MS+NAA0.2mg/L+椰子汁20g液体培养基上,黑暗静置培养20d,然后置于光下培养,待外植体转绿后,移入诱导培养 基:MS+BA6mg/L+IBA0.5mg/L+香蕉汁40g+苹果汁30g+马铃薯汁30g，固体培养。培养温度25-28℃,光照度为1500lx,每天光照10-12h。大约30d左右,外植体开始膨大并形成原球茎。 2.原球茎增殖 将原球茎取出,分割成小块,转入诱导培养基进行增殖培养,原球茎逐渐长大,并长出新的原球茎,45d后,原球茎可增殖3倍左右。原球茎增殖的同时,部分原球茎开始分化,逐渐形成幼苗。 3.生根与炼苗 将幼苗切割开,分开转入MS+NAA0.2mg/L的培养基中,20d后小苗基部可分化出1㎝左右的根。文心兰炼苗与蕙兰炼苗技术相同。 石斛兰 石斛（Dendrobium nobile）是兰科石斛属植物的总称，为兰科中最大的属。石斛兰不仅具有观赏价值，而且许多品种药用价值极高，是中药单方或复方中的重要成份。 石斛兰 石斛兰是种类最多而栽培最广泛的兰科植物，原生种达1600余种。原产中国、日本、泰国、印度、菲律宾、澳大利亚和新西兰等国家，大多数种类为热带气生兰。 石斛兰生长快易繁殖，花的形态各异、优美、花色艳丽多彩，花多而且花期长达数月，深得世界各地人民的喜爱。许多国家利用组织培养技术大量生产石斛兰盆花及鲜切花，泰国、新加坡、马来西亚等过已成为石斛兰的生产国和出口国。 1、采芽与消毒 将新生芽或带侧芽的假鳞茎，先冲洗干净，在8%的漂白粉清夜中浸15-20min，再用无菌水冲洗干净，在超净工作台上切下顶芽和侧芽，长度2-3㎝进行接种。 2、继代培养 在MS培养基中加入15%椰乳，以160r/min速度做液体振荡培养，10天左右换入新鲜培养液。温度26℃左右，24小时连续照明，光照强度2000lx，三个月后进行继代培养。 3、继代培养及育苗 继代培养可仍用初代培养基。以液体振荡培养为好。 状苗培养基可用附加有5%香蕉匀浆的MS固体培养基，一般2个月后长成小苗出瓶移栽。 4、试管苗的移栽与管理技术 芽增殖：MS+NAA0.1-0.5+6-BA0.5-2 生根：1/2MS+IBA0.1 PH5.4-5.8 原球茎培养过程 由母株上诱导的试管花 谢谢！ * * * * * * * * * * * * * * * * * * 蝴蝶兰花梗组织培养 蝴蝶兰腋芽萌发 叶基部、叶中段、叶尖部 MS+BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L+苹果汁 80g/L+蔗糖30g/L+琼脂10g/L+活性炭1g/L 为好。 培养条件：25℃，600lx，pH5.4~5.6 以基部0.5~1.0cm，上表面朝上平放为好 ㈡试管苗茎尖的培养 材料: 试管苗茎尖0.3mm左右 培养基:MS+BA 3～6mg/l+椰乳 温度: 25～28℃ 光强: 光照时间8～10h/d 14d后茎尖膨大，呈浅绿色半球状，3个月后，可诱 导原球茎。 ㈢原球茎培养 原球茎诱导 试管苗的嫩叶：MS+BA 4～6mg/l+IBA 0.5～1mg/l+胰蛋白胨2g/l+椰乳40g/l 25～28℃，1500～2000lx，光照10h/d，逐渐出现愈伤组织状的早期原球茎。 原球茎继代培养 将原球茎切割长数小块， 继代培养50～60d转接一次，增殖倍数为10～12，实现蝴蝶兰生产的工厂化育苗。 ㈣生根与炼苗 生根：MS+IAA0.5 70多天后，具4～5条根 的小苗，可出瓶种植。 炼苗：置于室温7～10 d后，打开瓶盖2天，取出小苗假植于水苔上。 商业化生产 问题探究 问题探究 1．如何选择蝴蝶兰外植体？ 2．什么是原球茎？ 3．什么是胚状体的发生？ 4．什么是人工种子？ 如何选择蝴蝶兰外植体？ 蝴蝶兰进行组织培养快速繁殖常用的外植体主要有茎尖、茎段、叶片、根尖、根段、花梗腋芽、花梗节间切段、幼胚、种子等。各个外植体培养成功的难易程度不同，诱导率不同，适于的诱导培养的途径不同。 茎尖是较容易诱导培养、成功率较高的部位,但蝴蝶兰为单茎性植物, 摘取其茎尖就有可能损失母株, 造成浪费。