[高等教育]第六章微生物发酵.pptVIP

第一节 温度控制 四、温度的选择与控制 1.最适温度的选择 ⑴ 根据菌种及生长阶段来选择 如黑曲霉生长温度为37℃；谷氨酸产生菌棒状杆菌的生长温度为30～32 ℃ ；青霉菌生长温度为30 ℃ 。 在生长阶段，应选择最适生长温度； 在产物分泌阶段，应选择最适生产温度。如谷氨酸发酵时，最适生长温度30-34 ℃ ，产生谷氨酸的温度为36-37℃ ⑵ 根据培养条件选择 温度选择还要根据培养条件综合考虑，灵活选择。 通气条件差时可适当降低温度，使菌呼吸速率降低些，溶氧浓度也可髙些。 培养基稀薄时，温度也该低些。因为温度高营养利用快，会使菌过早自溶。 ⑶ 根据菌生长情况 菌生长快，维持在较高温度时间要短些；菌生长慢，维持较高温度时间可长些。培养条件适宜，如营养丰富，通气能满足，那么前期温度可髙些，以利于菌的生长。 总的来说，温度的选择根据菌种生长阶段及培养条件综合考虑。要通过反复实践来定出最适温度。 2. 温度的控制 设施：在发酵罐上安装夹套和蛇管，通过循环冷却水控制。 冷却介质：深井水或冷冻水 控制方式：手动控制或自动控制 第二节 pH对发酵的影响和控制 一、pH值对菌体生长和代谢产物合成的影响 菌种不同，对pH要求不同 菌种相同，pH不同，形成的产物不同 菌种生成和发酵的最适pH不同，形成的产物不同 pH对微生物生长和产物合成影响的原因： 1.影响细胞膜所带电荷的状态，改变细胞膜的通透性，影响营养物质吸收和代谢产物分泌； 2.影响酶的活性，阻碍菌体的新陈代谢； 3.影响培养基中某些组分的解离，从而影响吸收； 4.影响代谢过程，使代谢产物的质量和比例发生改变。 5.影响菌体形态。 二、发酵过程中影响发酵液pH变化的因素 选择原则：既有利于菌体的生长繁殖，又最大限度地合成代谢产物。 pH 选择 调节发酵培养基初始pH，在发酵过程中定时测定和调节pH，以菌体生长达到最高值的pH为菌体生长的合适pH，以产物合成达到最高值为产物合成合适的pH。 利福霉素发酵，当pH7.0时，平均得率系数最大，从经济角度考虑各种参数，平均得率系数最重要，故pH7.0是生产利福霉素B的最佳条件。 pH的控制 通过中间补料控制合适的pH，采用补料的方法，可以同时实现补充营养、延长发酵周期、调节pH和培养液特性。 青霉素发酵中，通过调节补糖速率控制pH，比用恒速加糖，pH由酸碱控制提高青霉素产量25％。 pH的控制 在培养液的缓冲能力不强的情况下，pH可反映菌的生理状况，如pH上升超过最适值，意味菌处在饥饿状态，可加糖调节，但加糖过量又会使pH下降。用氨水中和有机酸时，过量的NH3会使微生物中毒。用NaOH或Ca(OH)2调节pH，需注意培养基的离子强度和产物的可溶性。 发酵液pH变化是菌体代谢的综合结果，从代谢曲线的pH值变化可以推测发酵罐中各种生化反应的进展和pH变化异常的可能原因。 例： 配制不同初始pH的培养基，摇瓶考察发酵情况 第三节 溶氧对发酵的影响及控制 一、溶氧控制的意义 微生物只能利用溶解于液体中的氧。溶氧(DO)是需氧微生物生长所必需。在发酵过程中有多方面的限制因素，而溶氧往往是最易成为控制因素。 氧是一种难溶于水的气体。在25℃，1×105 Pa条件下，空气中的氧在纯水中溶解度0.25mmol/L。在28℃氧在在发酵液中的溶解度只有0.22 mmol/L。 　 在微生物的培养过程中，应保持供氧与耗氧的平衡，满足微生物对氧的利用。 为避免发酵处于限氧条件下，需要考查每一种发酵产物的临界氧浓度和最适溶氧浓度，并使发酵过程保持在最适溶氧浓度。 初级代谢的氨基酸发酵，需氧量的大小与氨基酸的合成途径相关。据需氧要求可分为三类： 第一类有谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(G1n)、精氨酸(Arg)和脯氨酸(Fro)等谷氨酸系氨基酸，它们在菌体呼吸充足的条件下，产量才最大，如果供氧不足，氨基酸合成就会受到强烈的抑制，大量积累乳酸和琥珀酸； 第二类，包括异亮氨酸(ILe)、赖氨酸(Iys)、苏氨酸(Thr)和天冬氨酸(Asp)，即天冬氨酸系氨基酸，供氧充足可得最高产量，但供氧受限，产量受影响不明显； 第三类，有亮氨酸、濒氨酸(Val)和苯丙氨酸(Phe)，仅在供氧受限、细胞呼吸受抑制时，才能获得最大量的氨基酸，如果供氧充足，产物生成反而受到抑制。 三、供氧与微生物呼吸及代谢产物的关系 　微生物的“需氧” 可用耗氧速率或呼吸强度来表示： 　呼吸强度（respiratory strength)：单位质量的细胞干重在单位时间的耗氧量。单位为 mmol O2/(g ·干细胞 ·h) ，用Ｑo2表示 　耗氧速率（oxygen uptake rate