[工学]2第三章微生物的代谢调节和代谢工程++.pptVIP

一、酶活性调节;1、共价修饰;酶可逆共价修饰的意义：;2、变构控制; 一）酶合成调节的类型;组成酶 ;? 诱导剂可以是诱导酶的底物，也可是底物的结构类似物 如：乳糖是大肠杆菌?-半乳糖苷酶合成的诱导剂，也是此酶的底物 [实际上乳糖不是真正的诱导物，它必须先转化为别乳糖才能起诱导剂的作用];酶的诱导可分两种：;2、酶合成的阻遏(repression);?指由某代谢途径末端产物过量积累而引起的阻遏。;分解代谢物阻遏 (catabolite repression);? 最典型的例子是细胞通过最易利用的碳源（如葡萄糖）的分解产物来抑制一些酶的合成。;把大肠杆菌培养在含有葡萄糖和乳糖的培养基中，可明显看到大肠杆菌经历了两个对数期。;; 二）酶合成调节的分子机制;lacI;单一效应物调节;lacI;两种效应物的共同调节;lacI;无乳糖 关;三、分支生物合成途径的调节;2、协同反馈调节(concerted feedback regulation);3、累加反馈调节 (cumulative feedback regulation);4、增效反馈调节 (cooperative feedback regulation);5、顺序反馈调节 (sequential feedback regulation);6、联合激活或抑制调节;1、降低末端产物浓度;利用营养缺陷型积累 直链代谢途径中间代谢产物;A; 但是，完全不能合成产物E的突变体，因为不能利用E去进一步合成必须的细胞物质，所以无法正常生长。为了保证突变体的正常生长，培养时须提供低浓度的、不足以引起反馈调节的物质E。这样高浓度的中间产物C就能积累起来了。;利用营养缺陷型积累 分支代谢途径中的中间产物;A;在分支途径中，如果减少某一末端产物的浓度，常常可以积累另一末端产物。;C. glutamicum 的代谢调节与赖氨酸生产;2、抗反馈调节突变株的利用;? 抗反馈突变株由于基因突变，它们的酶或无活性的原阻遏物不再与末端产物结合，从而不再发生酶的变构及阻遏物的活化，或者活性阻遏物不能再与发生了突变的操纵基因结合，因此反馈调节被打破，即使在末端产物过量的情况下，也同样可以积累高浓度的末端产物。;抗反馈调节突变株的获得：;? 末端产物类似物和末端产物结构类似，因而能够引起反馈，但是它们不能参与生物合成。; 在工业上，生产氨基酸、嘌呤、嘧啶和维生素的生产菌种大??是抗反馈突变株。;二、克服分解代谢阻遏的调控;1、避免使用有阻遏作用的碳源和氮源;2、流加碳源或氮源; 如调节基因发生突变，使产生的阻遏蛋白失活，不能与末端分解代谢产物结合；或操纵基因发生突变使阻遏蛋白不能与其结合，都能获得抗分解代谢阻遏的突变株。;筛选方法： 在以酶受阻遏的底物为唯一氮源的培养基上，选择能正常生长的菌落。;三、对诱导调节的控制;一、代谢工程概述;;? 代谢工程的实质在于对代谢流量及代谢控制进行定量分析，在此基础上进行代谢改造，最大限度地提高目的代谢产物的产率。;二、代谢工程的应用;1、改变代谢途径;2）改变分支代谢途径流向