兽药残留研究课件演示.ppt

（4）标准曲线 配制系列浓度（5～7个），每个浓度重复测定3～5次。 标准曲线的浓度梯度须涵盖样品可能的浓度范围，不得进行外推计算。 包括标准溶液和样品在贮存条件下的稳定性试验，如室温、冷冻、反复冻融条件下的稳定性。 （5）稳定性试验 标准添加法。 通常需设定至少3个浓度，每批每个浓度水平5次重复，进行5次单独试验，经统计处理后得到各效能指标。 （6）方法性能评价 概念： 指测定值与真实值的接近程度，表示分析结果的正确性。 表示方法： 添加回收率（recovery） 计算方法： 标准曲线法和单点校准法。 a. 准确度（accuracy） X=[(A-b) /a ÷(W/V)]/Cs ×100% X：试样中待测物的回收率； A：试样的峰高或峰面积； a: 标准曲线斜率； b: 标准曲线截距 W：试样的重量（g）； V：试样提取液浓缩吹干后残余物溶解的总体积（mL）。 Cs：已知标准添加浓度； 标准曲线法计算公式： 单点校准法计算公式： X=AV/AsW ×100% X：试样中待测物的回收率； A：试样的峰高或峰面积； As：标准工作液的峰高或峰面积； W：试样的重量（g）； V：试样提取液浓缩吹干后残余物溶解的总体积（mL）。 回收率要求： 概念： 指用某种方法重复测定同一均质样品所得测定值得彼此接近程度，表示分析结果得重复性。 表示方法： 相对标准偏差（RSD），又称变异系数（CV），计算公式： RSD＝SD/X.100％ b．精密度（precision） 重复性（repeatability）: 指在短期内相同的试验条件下对同一样品测定测定结果间的精密度。 批（日）内RSD（within-run precision） 批（日）间RSD（between-run precision）。 两层含义: 重现性(reproducibility): 指不同实验条件下使用相同分析方法对同一样品各个独立测定值间的变异程度。 精密度要求： 检测限（limit of detection,LOD） 指分析方法能够从样品的背景信号中检测出待测物存在时所需的最低浓度，是反映分析方法灵敏度的效能指标。 一般要求残留分析方法的LOD≤0.1MRL。 C. 检测限与定量限 定量限（limit of quantitation,LOQ）： 指分析方法能够对样品中待测物进行定量测定的最低浓度。LOQ反映了方法在低浓度端分析结果的可靠性，一般要求CV≤20％，回收率≥70％。 通常要求残留分析方法的LOQ≤0.2MRL。 （二）要求 试验动物必须选择对化学物质的代谢方式与人相似的动物种类。 选择的剂量要能够在其血浆和靶器官中产生与人相应的浓度。 应选择最佳的试验组合。 必须对受试物可能对人畜健康造成的危害及可能的有益作用之间进行综合评价。 1. 日许量的确定 日许量 (ADI) ：指人终生每日摄入某种药物或 化学物质后，对其健康不产生 可觉察有害作用的剂量。 四、安全浓度的确定 计算方法如下： NOEL (mg/kg b.w./d)×60 kg b.w. ADI= 安全因子 单位：mg/kg b.w./d 或mg/60kg b.w./d 安全浓度：食品动物用药后其所有可食用组织中 与药物有关的总残留浓度。 STC = ADI÷食耗因子（TCF） TCF：肌肉 300 g； 肝脏 100 g；脂肪 50 g； 肾脏 50 g； 鸡蛋 100 g；牛奶 1.5 L 2. 安全浓度的确定 (STC) 第3节 残留的化学评价 一、目的 阐明药物在动物体内的总残留消除规律，存在的稳定状态，主要代谢方式、代谢程度、代谢形式及种属差异。 确定药物在动物的残留靶组织、残留标识物、最高残留限量（MRL）及休药期标准。 总残留研究 代谢研究 休药期研究 分析方法研究 二、研究内容 （一）总残留研究 1、概念： 由游离化合物、游离代谢物及它们与内源性大分子的结合物几部分组成。 2、研究目标: 药物在动物体内的总残留消除规律，存在的稳定状态及主要代谢物。 放射性标记法（“热”研究法） 直