全血中性粒细胞分离方法对fMLP诱导极性化的影响-南方医科大学学报.PDFVIP

窑1514窑 南方医科大学学报(JSouthMedUniv) 2010;30(7) 全血中性粒细胞分离方法对fMLP诱导极性化的影响 1 1 2 1 1 1 1 1 罗琼 袁蔡春青 袁谢翠华 袁楚心唯 袁武清宜 袁孟晓静 袁邹飞 (南方医科大学 公共卫生与热带医学学院职业 2 卫生与职业医学系袁 南方医院内分泌代谢科袁广东广州510515) 摘要院目的 比较Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法两种常用的中性粒细胞分离方法袁为中性粒细胞极性 化研究提供有效手段遥 方法 取健康成年人外周血袁采用Percoll 非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法分离中性粒 细胞袁分别检测分离后的中性粒细胞的极性尧纯度尧存活率袁比较二者对极性信号分子 2+ F-actin 的聚合和胞内Ca 的影 响遥 结果二者在极性率尧纯度尧存活率方面并不存在显著性差异袁但Dextran沉降法在fMLP诱导细胞极性3min 内对 2+ 2+ F-actin的聚合产生抑制作用袁同时可使胞内Ca 升高的Ca 峰降低约25%遥 结论对PMNs极性功能研究时袁两种分离 方法都可以选择遥 Percoll 非连续密度梯度离心法更有优势袁但在需要纯化大量PMNs 时袁Dextran沉降法也是一种好的 选择遥 关键 院中性粒细胞曰极性曰Percoll 非连续密度梯度离心法曰Dextran沉降法 中图分类号院R331.1 文献标识码院A 文章编号院1673-4254渊2010冤07-1514-04 Dextransedimentationforstudyofneutrophilpolarization 1 1 2 1 1 1 1 LUOQiong ,CAIChun-qing,XIEXui-hua,CHUXin-wei,WUQing-yi,MENGXiao-jing ,ZOUFei 1 DepartmentofOccupationalHealthandOccupationalMedicine,SchoolofPublicHealth ,DepartmentofEndocrinologyandMetabolism, NanfangHospital2, SouthernMedicalUniversity,Guangzhou510515,China Abstract: Objective To determine the optimal method for separating neutrophils for studying neutrophil polarization. Methods HumanneutrophilwasseparatedfromhealthyhumanperipheralbloodbyPercolldensitygradientcentrifugationand Dextran sedimentation. The cell polarization, purity and activity of the neutrophils were determined, and F-actin polymerizationand[Ca2+] wereanalyzed. ResultsNosignificantdifferencewasfoun