[历史学]实验八微生物生理生化特性检测糖发酵、氨化作用、甲基红试验等.pdf

实验八 微生物生理生化特性检测 （糖发酵、氨化作用、甲基红试验等) 本次实验内容： 一 糖发酵试验 二 好气氨化作用试验 三 IMViC与硫化氢试验 一 糖发酵试验 1 目的要求 2 基本原理 3 试验材料 4 操作步骤 1 目的要求 了解糖发酵的原理。 掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 巩固微生物接种技术 2 基本原理 不同细菌对糖的分解利用能力存在较大 差异，且产物不同，是常用的鉴别微生物的 生化方法。有些细菌能分解某种糖产生有机 酸和气体；有些细菌只产酸不产气。若产酸， 可根据培养基特定的酸碱指示剂的特征性的 颜色变化检测；若产气，可从培养基中的杜 氏小管中是否有气泡观测。 3 试验材料 培养基—— 无菌葡萄糖发酵培养基 无菌蔗糖发酵培养基 菌种—— 大肠杆菌 枯草杆菌 4 操作步骤 在试管外壁标明发酵培养基名称和接种细菌菌名。 取葡萄糖发酵培养基试管3支，分别接种大肠杆菌、枯草 杆菌，第三支不接做对照；取蔗糖发酵培养基试管3支，分 别接种大肠杆菌、枯草杆菌，第三支不接做对照。 将接种的和做对照的6支试管放置28~30℃培养2~3天。 观察各试管颜色变化及杜氏小管中是否有气泡。 供试糖 葡萄糖 蔗糖 大肠杆菌 产酸 产气 枯草杆菌 产酸 产气 对照 产酸、产气 注：记录生长情况用符号表示：　　 — ：不生长； +：生长差； ++：生长一般； +++：生长良好 二 好气氨化作用试验 1 目的要求 2 基本原理 3 试验材料 4 操作步骤 1 目的要求 了解好气氨化作用的原理 掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 巩固微生物的接种技术 2 基本原理 不同微生物对含氮化合物分解能力及代 谢途径、最终产物不尽相同，这些特征性 生化反应可作为菌种鉴定的重要依据。微 生物可分解含氮有机物，最终产生氨气。 以酸碱指示剂试纸检测。 3 试验材料 培养基—— 牛肉膏蛋白胨液体培养基 菌种—— 土壤颗粒 大肠杆菌 枯草杆菌 4操作步骤 （1）取牛肉膏蛋白胨液体培养基四支，分别接种土壤颗粒， 大肠杆菌、枯草杆菌，余下一支不接种作为空白对照，在每 支试管口悬挂一经无菌水湿润的石蕊试纸，并加好试管塞。 （2）将已经接种的培养管置于28--30℃培养5--7日。 （3）结果检测： 　观察各管石蕊试纸变色及培养液浑浊情况，用奈氏试剂检 测是否有氨产生。 好气氨化试验 接种 土壤颗粒 大肠杆菌 枯草杆菌 空白对照 检测 菌样 项目 培养液 浑浊程度 石蕊试纸 变色程度 三IMVIC与硫化氢试验 1 目的要求 2 基本原理 3 试验材料 4 操作步骤