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第五章 酶 第一节 酶的一般概况 一、酶是生物催化剂 酶是一类由活性细胞产生的具有催化作用和高度专一性的特殊蛋白质。简单说，酶是一类由活性细胞产生的生物催化剂 (biocatalyst) 酶与化学催化剂的共性 1、用量少而催化效率高; 2、不改变化学反应的平衡点; 3、可降低反应所需的活化能． 酶专一性类型 消化道内几种蛋白酶的专一性 消化道蛋白酶作用的专一性 酶的化学本质 蛋白质 核糖酶（ribozyme） 80年代切克和阿尔特曼发现四膜虫的L19RNA具有多种酶的催化功能.这说明有催化作用的生物催化剂不一定是蛋白质.将这类具有催化作用的RNA称为核糖酶(ribozyme). 酶促反应速度的测定与酶的活力单位 酶活力是指酶催化底物化学反应的能力。实际上就是测定酶促反应进行的速度。 酶反应速度表示方法 1.单位时间内底物浓度的减少量 2.单位时间内产物浓度的增加量 一般用反应初速度表示 初速度：底物开始反应后，很短一段时间内的反应速度。 酶促反应初速度的概念 酶活力测定方法  酶活力的表示方法 　　　 1.称取25mg蛋白酶粉配制成25毫升酶溶液,从中取出0.1毫升酶液,以酪蛋白为底物,用Folin-酚比色法测定酶活力,得知每小时产生1500微克酪氨酸.另取2毫升酶液,用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2毫克(蛋白质中氮的含量比较固定:16%).若以每分钟产生l微克酪氨酸的酶量为1个活力单位计算.根据以上数据求:(a)1毫升酶液中所含蛋白质量及活力单位.(b)比活力.(c)1克酶制剂的总蛋白含量及总活力. 2.从肝细胞中提取的一种蛋白水解酶的粗提液300ml含有150mg蛋白质,总活力为360单位.经过一系列纯化步骤以后得到的4ml酶制品(含有0.08mg蛋白),总活力为288单位.整个纯化过程的收率是多少 纯化了多少倍 ? 第二节 酶的组成与辅酶 3.维生素 大多数维生素可以作为辅基和辅酶的组成成分，参与体内代谢。维生素B族。 第三节 酶的结构和功能的关系 一. 酶的活性部位或酶的活性中心 酶的催化作用有赖于酶分子的一级结构及空间结构的完整。若酶分子变性或亚基解聚均可导致酶活性丧失。 酶的活性中心（active center）：酶分子中能直接与底物分子结合，并催化底物化学反应的部位。 胰凝乳蛋白酶的活性中心 酶活性中心的氨基酸残基的侧链存在不同的功能基团，如-NH2、-COOH、-SH、-OH和咪唑基等，它们来自酶分子多肽链的不同部位。 有的基团在与底物结合时起结合基团(binding group)的作用 有的在催化反应中起催化基团(catalytic group)的作用。 参与构成酶的活性中心和维持酶的特定构象所必需的基团为酶分子的必需基团(essential group)。 酶原激活 酶原：不具催化活性的酶的前体称为酶原（zymogen） 酶原的激活：使无活性酶原转变成有活性的酶的过程称为酶原的激活。 使无活性的酶原转变为有活性的酶的物质称为活化素。 酶原激活的机制为：酶原分子一级结构的改变导致了酶原分子空间结构的改变，使催化活性中心得以形成，故使其从无活性的酶原形式转变为有活性的酶。 胰蛋白酶原的激活示意图 酶原激活的本质:是切断酶原分子中特异肽键或去除部分肽段后有利于酶活性中心的形成。 酶原激活有重要的生理意义，保护自身组织细胞不被酶水解消化。 什么是酶原激活？它有何生物意义？ (2010年考题8分) 酶的多种分子形式——同工酶 乳酸脱氢酶同工酶形成示意图 不同组织中LDH同工酶的电泳图谱 心肌中以LDH1含量最多，LDH1对乳酸的亲和力较高，因此它的主要作用是催化乳酸转变为丙酮酸再进一步氧化分解，以供应心肌的能量。 在骨骼肌中含量最多的是LDH5，LDH5对丙酮酸的亲和力较高，因此它的主要作用是催化丙酮酸转变为乳酸，以促进糖酵解的进行。 第三节 酶的作用机理 二、中间复合物学说 酶催化时，酶活性中心首先与底物结合生成一种酶-底物复合物（ES），此复合物再分解释放出酶，并生成产物。 S + E SE E + P 许多实验事实证明了E－S复合物的存在。E－S复合物形成的速率与酶和底物的性质有关。 酶催化的中间产物理论 酶作用专一性机理 酶专一性的“锁钥学说” 酶作用专一性机理 酶专一性的“诱导契合学说” 四、与酶的高效率有关的主要因素 酶分子中可作为酸硷催化的功能基团 酶分子中可作为亲核基团和酸硷催化的功能基团 胰凝乳蛋白酶分子中催化三联体构象 第五节 影响酶促反应速度的因素 （酶促反