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荧光量子产率测量单元简易操作流程.pdf

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荧光量子产率测量单元简易操作流程

荧光量子产率测量单元简易操作流程  1.荧光量子产率测量流程  获取积分球校正系数  扩散素子数据 :扩散素子(标准状态) 无样品的校正系数(基准):三氧化二铝粉末 有样品的校正系数(试样):光谱标准白板 【使用卡式滤光片时】 基线数据卡式滤光片数据 设定分析条件  点击左侧快捷框后,进入条件设定画面。 (参照F-7000使用说明书2.2节)   设定样品表  点击左侧快捷框后,进入样品表画面。 (参照F-7000使用说明书2.3节) 荧光量子产率测量单元简易操作流程   测  量  (参照量子产率运算程序使用说明书3章) 测量数据  无样品的校正系数(基准):三氧化二铝粉末 有样品的校正系数(试样):光谱标准白板 点击左侧快捷框后,进入样品表画面。  当激发光的2级光谱与荧光光谱重迭时:  如发生上述情况,使用卡式滤光片来获取数据   当间接激发有问题时:  如发生上述情况,利用间接激发的成分检测各数据  计算量子产率  点击左侧快捷框(参照量子产率运算程序使用说明书4章)  读取/写入测量数据: 无样品(基准)时测量数据的读取/写入 荧光量子产率测量单元简易操作流程  有样品(试样)时测量数据的读取/写入 输入计算波长: 输入散射光范围、荧光范围 打印和保存测量结果    2.分析指导  (1)测量前的准备工作 准备物品 为了量子产率测量而必须准备的物品如下: φ60积分球附属设备、扩散素子、光谱标准白板、三氧化二铝粉末、 加宽粉末池、卡式滤光片  校正系数的获取 首先要取得下面的校正系数: ①激发侧、荧光侧分光器的校正系数(参照F-7000荧光光度计使 用说明书的操作篇) 仪器函数:罗丹明B、扩散素子、副标准光源等 ②积分球校正系数(参照量子产率运算程序使用说明书) 扩散素子数据 :扩散素子(标准状态) 无样品的(基准)校正系数:三氧化二铝粉末 有样品的(试样)校正系数:光谱标准白板 ③滤光片校正系数(参照量子产率运算程序使用说明书) 基线数据 :扩散素子(标准状态) 荧光量子产率测量单元简易操作流程  滤光片数据:卡式滤光片(标准状态)     (2)量子产率分析条件的设置  ①荧光光谱的设定 ②激发波长的任意设定(250nm~800nm的范围) ③荧光起始波长的设定(240nm~800nm的范围)    在运算中为了测量散射光的强度,荧光起始波长的设定要比激发 波长还要短一些。  荧光起始波长的设定:(激发波长)-(2倍的狭缝nm)-(20nm)。  上式中关于狭缝宽度的选择为激发侧或发射侧中最宽的一方。  例如:当激发波长=350nm、Ex=5nm、Em=5nm时  荧光量子产率测量单元简易操作流程  荧光起始波长=350-(5×2)-20=320nm  ④荧光终止波长的设定(250nm~800nm的范围) ⑤扫描速度的设定 240nm/min或者1200nm/min均为出厂时的设定值。 ⑥激发侧、荧光侧狭缝的设定 激发侧狭缝、荧光侧狭缝:5nm~5nm均为出厂时的设定值。 ⑦光电倍增管负高压的设定 光电倍增管电压选定PTMVoltage0~1000V后设定为350V。  光电倍增管工作电压的设定以激发光的散射光的强度不超过 10,000为准。当超过10,000时,请降低光电倍增管的工作电压。  ⑧

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