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荧光量子产率测量单元简易操作流程
荧光量子产率测量单元简易操作流程
1.荧光量子产率测量流程
获取积分球校正系数
扩散素子数据 :扩散素子(标准状态)
无样品的校正系数(基准):三氧化二铝粉末
有样品的校正系数(试样):光谱标准白板
【使用卡式滤光片时】
基线数据卡式滤光片数据
设定分析条件
点击左侧快捷框后,进入条件设定画面。
(参照F-7000使用说明书2.2节)
设定样品表
点击左侧快捷框后,进入样品表画面。
(参照F-7000使用说明书2.3节)
荧光量子产率测量单元简易操作流程
测 量 (参照量子产率运算程序使用说明书3章)
测量数据
无样品的校正系数(基准):三氧化二铝粉末
有样品的校正系数(试样):光谱标准白板
点击左侧快捷框后,进入样品表画面。
当激发光的2级光谱与荧光光谱重迭时:
如发生上述情况,使用卡式滤光片来获取数据
当间接激发有问题时:
如发生上述情况,利用间接激发的成分检测各数据
计算量子产率
点击左侧快捷框(参照量子产率运算程序使用说明书4章)
读取/写入测量数据:
无样品(基准)时测量数据的读取/写入
荧光量子产率测量单元简易操作流程
有样品(试样)时测量数据的读取/写入
输入计算波长:
输入散射光范围、荧光范围
打印和保存测量结果
2.分析指导
(1)测量前的准备工作
准备物品
为了量子产率测量而必须准备的物品如下:
φ60积分球附属设备、扩散素子、光谱标准白板、三氧化二铝粉末、
加宽粉末池、卡式滤光片
校正系数的获取
首先要取得下面的校正系数:
①激发侧、荧光侧分光器的校正系数(参照F-7000荧光光度计使
用说明书的操作篇)
仪器函数:罗丹明B、扩散素子、副标准光源等
②积分球校正系数(参照量子产率运算程序使用说明书)
扩散素子数据 :扩散素子(标准状态)
无样品的(基准)校正系数:三氧化二铝粉末
有样品的(试样)校正系数:光谱标准白板
③滤光片校正系数(参照量子产率运算程序使用说明书)
基线数据 :扩散素子(标准状态)
荧光量子产率测量单元简易操作流程
滤光片数据:卡式滤光片(标准状态)
(2)量子产率分析条件的设置
①荧光光谱的设定
②激发波长的任意设定(250nm~800nm的范围)
③荧光起始波长的设定(240nm~800nm的范围)
在运算中为了测量散射光的强度,荧光起始波长的设定要比激发
波长还要短一些。
荧光起始波长的设定:(激发波长)-(2倍的狭缝nm)-(20nm)。
上式中关于狭缝宽度的选择为激发侧或发射侧中最宽的一方。
例如:当激发波长=350nm、Ex=5nm、Em=5nm时
荧光量子产率测量单元简易操作流程
荧光起始波长=350-(5×2)-20=320nm
④荧光终止波长的设定(250nm~800nm的范围)
⑤扫描速度的设定
240nm/min或者1200nm/min均为出厂时的设定值。
⑥激发侧、荧光侧狭缝的设定
激发侧狭缝、荧光侧狭缝:5nm~5nm均为出厂时的设定值。
⑦光电倍增管负高压的设定
光电倍增管电压选定PTMVoltage0~1000V后设定为350V。
光电倍增管工作电压的设定以激发光的散射光的强度不超过
10,000为准。当超过10,000时,请降低光电倍增管的工作电压。
⑧
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