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[理学]第19章 氨基酸蛋白质核酸2011
2) 蛋白质的沉淀 由前述可知, 维持蛋白质溶液稳定的主要因素是蛋白质分子表面的水化膜和双电层。若用化学或物理的方法破坏蛋白质的这两种因素,则蛋白质分子将凝聚而沉淀。常用的方法有 盐析 有机溶剂沉淀蛋白质 重金属盐沉淀蛋白质 生物碱或酸试剂 蛋白质的变性和水解 变性:是蛋白质受物理和化学因素的影响, 改变其分子内部结构和性质的作用。 化学因素: 强酸、碱, 尿素, 重金属盐, 三氯乙酸, 乙醇,丙酮等; 物理因素:干燥, 加热, 高温,高压,激烈震荡或搅拌,紫外线, X-射线的照射,超声波处理等。 蛋白质变性后的显著表现: 溶解度降低(等电点时特明显); 黏度升高、结晶破坏、对水解酶的抵抗力降低(变性蛋白易消化); 生物活性丧失等。即蛋白质的变性不仅改变其物理性质,而且也改变其生物性质。 变性 凝固 有关变性的机制人们作了大量的研究。 一般认为,蛋白质的二级、三级结构的改变或遭到破坏都是变性的结果。 若破坏三级结构,则可能只引起可逆的变性; 若破坏二级结构,则会引起不可逆的变性。但不会破坏蛋白质的一级结构。 蛋白质的可逆和不可逆变性作用,在生命过程中起着非常重要的作用。 因为蛋白质变性时,其亲水性以及其它相互作用的能力也发生变化。如随着肌体的老化(衰老), 蛋白质便逐渐极缓慢的变性。 因此,积极研究和防止蛋白质变性(衰老)的过程,是当今科学家的重大任务之一. 蛋白质的水解 19.4 核酸 核酸是1868年由瑞士生物学家Miescher 从细胞核中分离出的一种含磷酸性物质, 因此得名核酸。 它的发现为人类提供了解开生命之迷的金钥匙, 生物所特有的生长、繁殖机能以及遗传和变异的特征都是由核蛋白起主要作用。核蛋白是由蛋白质与核酸所组成的结合蛋白。 蛋白质是生物体用以表达各种功能的具体工具,而核酸是生物体用来制造蛋白质的模型。没有核酸就没有蛋白质,故核酸是最根本的生命物质基础。 1. 核酸的分类核化学组成 分类: 核酸是由许多核苷酸单位组成的生物高分子。依据所含戊糖的种类,分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)两类。 DNA: 主要存于细胞核和线粒体中, 是生物遗传的主要物质基础,承担体内遗传信息的储存和发布。 RNA: 主要存于细胞质中( 90%),直接参与体内蛋白质的合成。依据在蛋白质合成过程中所起作用的不同,RNA可分为: RNA 核蛋白体RNA(rRNA), 占RNA的80~90%, 是“装配机”. 信使RNA(mRNA), 是合成蛋白质时的摸板, 控制氨基酸的排序。 转运RNA(tRNA), 是搬运氨基酸的工具. 2) 化学组成: 核酸分子中所含元素主要为C、H、O、N、P等; 其中,P的含量为9~10%,常以测定P的含量来确定核 酸的含量。 从结构上,核酸的基本单位是核苷酸: b-D-核糖 b-D-2-脱氧核糖 核糖:二类 有机碱:五个 腺嘌呤 A 鸟嘌呤 G 胞嘧啶 C 胸腺嘧啶 T 尿嘧啶 U RNA和DNA中都含有嘌呤碱,差别在于RNA不含胸腺嘧啶,而DNA中不含尿嘧啶。 1)核苷:戊糖与碱生成的b-苷,称为核苷。 DNA中常见的四种脱氧核苷: 腺嘌呤脱氧核苷(脱氧腺苷) 鸟嘌呤脱氧核苷(脱氧鸟苷) 胞嘧啶脱氧核苷(脱氧胞苷) 胸腺嘧啶脱氧核苷(脱氧胸苷) RNA中常见的四种核糖核苷为: 腺嘌呤核苷(腺苷) 鸟嘌呤核苷(鸟苷) 胞嘧啶核苷(胞苷) 尿嘧啶核苷(尿苷) 核苷是由核糖C1上的b-羟基与嘌呤9位或嘧啶1位N上的H脱水而成的氮苷。氮苷对碱稳定,在强酸下会水解。 命名时注意: 核糖上的编号数加“′”字, 以示与碱基的编号相区别;核糖则用“苷”字,脱氧核糖则加“脱氧”二字. 2) 核苷酸:是核苷分子中的核糖或脱氧核糖的3’或5’位的羟基与膦酸生成的酯. 生物体内大多为5’-核苷酸,是一个二元酸。 腺苷酸(5’-腺苷-磷酸) 脱氧胞苷酸(5’-脱氧胞苷-磷酸) 脱氧腺苷酸(5’-脱氧腺苷-磷酸) 组成RNA的是腺苷酸、鸟苷酸、胞苷酸和尿苷酸; 组成DNA的是脱氧腺苷酸、脱氧鸟苷酸、脱氧胞苷酸和脱氧 胸苷酸。 3. 核酸的结构 1) 核酸的一级结构:核酸是核苷酸通过磷酸二酯键连接起来的生物大分子。在核酸中各核苷酸排列的次序,即为核酸的一级结构。 由于核酸的差别仅在于碱基的不同,故又称为碱基序列。 在核酸分子中,各核苷酸是通过3’, 5’-磷酸二酯键来连接的。即一个核苷酸的3’-羟基与另一个核苷酸的5’-磷酸基形成酯键,构成无支链的核酸大分子. DNA和RNA的部分多核苷酸连接结构为: DNA 5’-端 3’-端 A C G T 5’-端 3’-端 RNA DN
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