[高等教育]核酸 第四节.pptVIP

1、 转录的概念 转录: 是在 DNA的指导下的RNA聚合酶的催化下，按照碱基配对的原则，以四种核苷酸为原料合成一条与模板DNA互补的RNA 的过程。RNA的转录从DNA模板的特定位点开始，并在一定的位点终止。此转录区域为一个转录单位。 模板链及反意义链：指导RNA合成的DNA链为模板链，又称反意义链 ??? 编码链及有意义链：不作为转录的另一条DNA链为编码链，又称有意义链 原核RNA聚合酶 组成：RNA聚合酶由5个亚基构成，αα’ββ’σ为全酶,αα’ββ’为核心酶 作用： a、识别DNA分子中转录的起始部位。 b、促进与模板链结合，并使DNA双链打开17bp。 c、催化NTP的聚合，完成一条RNA链的聚合反应。 d、识别转录终止信号，停止聚合反应 e、参与转录水平的调控 真核RNA聚合酶 真核较原核的酶复杂，已清楚的有RNA PolⅠ,Ⅱ,Ⅲ 组成和功能：均由多亚基构成，聚合酶Ⅱ主要负责mRNA的合成； PolⅠ主要负责rRNA的合成； PolⅢ主要负责tRNA和5srRNA的合成 B、延长 转录泡：是由DNA双链,RNA聚合酶与新合成的转录本RNA局部形成的结构,它贯穿于延长过程的始终 ???? 过程：在起始阶段形成第一个磷酸二酯键后，RNA聚合酶核心酶沿模板向下游移动，核苷酸之间以3,5磷酸二酯键相连，合成方向5→3，合成的RNA自3末端逐步延长。合成出的RNA与DNA形成杂交分子,约12bp，因结合不紧很易脱离 C、终止 合成移到终止信号时,酶不滑动,聚合停止,转录完成，提供终止信号的DNA序列称为终止子，它能使RNA聚合酶停止合成RNA并释放出RNA。原核生物有两种终止子： 二、 真核生物转录后的加工 意义：转录生成的前体RNA,无生物学活性,需加工变为成熟、有活性的RNA 加工种类：剪切与剪接、末端添加核苷酸、修饰、RNA编辑 1、mRNA的加工 2、rRNA的加工 3、tRNA的加工 成熟真核细胞mRNA的结构特点 ?1、mRNA前体的加工 A、mRNA的剪接： hnRNA被剪接体作用，剪除内含子、连接外显子，产生成熟的mRNA的过程 剪接的本质：磷酸酯键的转移 同一转录本, 在不同的组织, 因剪接差异产生各自不同的mRNA 2、rRNA前体的加工 特点：rRNA基因之间以纵向串联的方式重复排列。?????A、原核rRNA加工： rRNA含非转录的间隔区，需要核酸酶的剪切作用以及碱基修饰；其产物中含tRNA B、真核rRNA加工： 5S自成体系加工;???? 45S加工中含剪切和甲基化修饰，需核酸酶。 3、tRNA前体的加工 1、切除多余的核苷酸：RNase p切除5 端多余的核苷酸；Rnase D切除3端多余的核苷酸 2、剪切内含子：核酸内切酶切除内含子,连接酶进行连接 3、修饰与3‘末端加-CCA: 修饰包括甲基化,脱氨基,还原反应等，在核苷酸基转移酶催化下完成3’末端添加CCA 三、RNA的复制合成 ---RNA指导的RNA合成 四、逆转录作用 逆转录过程中cDNA的合成 逆转录病毒的生活周期 作业题 tRNA的加工 内含子编码区 内切核酸酶 外切核酸酶 P P P 5? 3? -OH 3’ DNA 内含子 初级转录物 3?端加CCA-OH 3? P 除去内含子 （内切酶与连接酶） CCA-OH 3? 成熟 tRNA 5? CCA-OH 内含子 5’和3’端的酶切 3’加上CCA 去掉内含子 特异部位碱基的加工 转移酶 5 ? RNA- 5 ? 3 ? 3 ? RNA+ 释放 释放 3? 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 5 ? RNA+ RNA+ RNA- RNA-及 RNA+的合成方向均为5‘ 3’ RNA的复制有以下几类： 1、含有RNA正链病毒 2、含有RNA负链病毒 5 ? RNA+ 5 ? 3 ? 3 ? RNA- 释放 释放 3? 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 5 ? RNA- RNA- RNA+ RNA-及 RNA+的合成方向均为5‘ 3’ 3、含有RNA双链病毒 3? 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 5 ? RNA+ RNA+ RNA- RNA-及 RNA+的合成方向均为5‘ 3’ 3 ? 3 ? 5 ? 5 ? RNA+ RNA- 不对称转录 4、含有RNA正链逆转录病毒 5 ? DNA- 5 ? 3 ? 3 ? RNA+ 释放 释放 3? 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 5