[农林牧渔]应用荧光定量实时pcr检测蜜蜂王浆主蛋白3基因的表达.docVIP

应用RT-PCR、SDS和GPC-RI-MALLS研究mrjp3基因表达及蛋白含量 第一章 文献综述 蜜蜂作为昆虫纲(Insecta)，膜翅目(Hymenoptera)，细腰亚目(Apoerita)蜜蜂总科(Apoidae)，蜜蜂科(Apidae)，蜜蜂属(Apis)中的经济昆虫。在被人类驯化后，能生产蜂蜜、蜂花粉、蜂蜡、蜂胶和蜂王浆等蜂产品，并为植物传授花粉，提高农作物的产量和质量[1]，在提供天然有机产品，维持生态平衡中发挥着重要作用。我国为世界养蜂大国饲养的蜂群数居世界第一约700万群，约占世界蜂群总数的八分之一。各地均有蜜蜂饲养，品种除了我国本地的中华蜜蜂（Apis ）以外，主要饲养的是生产能力极强的西方蜜蜂-意大利蜜蜂（Apis mellifera）即意蜂，分蜂性弱，能维持强群善于采集持续时间长的大蜜源。造脾快，产蜡多性温和，不怕光提脾检查时，蜜蜂安静。蜂王产卵力强，蜂哺育力强，分泌蜂王浆多，[3]。其次，蜂王浆加速了蜂王的个体发育，蜜蜂是一种全变态的社会性昆虫，即在个体发育中要经历卵、幼虫、蛹和成虫四个阶段。蜂王和工蜂的卵期都是3天，卵在3天之后孵化为幼虫，在王台之内的蜂干幼虫因为吃的是蜂干浆，其幼虫期只有5天，蛹期8天，到第16天羽化为蜂下。而那些在T蜂房内的幼虫，因为食料与蜂王幼虫不同，其幼虫虫期延长为6天，蛹期延长为12天，到第21天后方羽化为工蜂成虫，其个体发育为成虫的时间比蜂王多用了5天，其形体也比蜂王约小50%。再次，蜂王浆能维系蜂王的正常生理机能，使蜂王具有较长的寿命，它的寿命一般为3-4年，最多为8年;而吃蜂粮的工蜂，在生产季节只能存活50天左右，即使是在半冬眠状态的越冬期最多也只能活11个月。也就是说吃蜂王浆的蜂王，其平均寿命比吃蜂粮的工蜂增长了30倍以上。蜂王在蜂群中的主要职能是产卵，在繁殖季节它不停地在巢内产卵，最盛时一天可以产下1500-2000粒卵，这些卵的总重量约与蜂王自身的体重相等[4]。这样一台“产卵机器”全由蜂王浆所提供的营养来驱动和支持。由此可见蜂王浆本身具有神奇的营养和调节功能。 1.2 蜂王浆的理化性质 1.2.1 蜂王浆的物理性质 新鲜的蜂王浆多数呈乳白色或淡黄色，个别呈微褐色，为半透明的浆状物质，有光泽，手感细腻，微粘，无气泡，无杂质，具有蜂王浆独特的香气，口感微甜、酸、涩和辛辣。蜂王浆部分溶于水，呈悬浊液，能溶于强酸和强碱，部分溶解于乙醇，产生白色沉淀，但小于蜂蜜，放置一段时间后分层。蜂王浆的比重略大于水，比重为1.08，蜂王浆一般pH值为3.5-4.5，性质不稳定，常温下容易变质。 蜂王浆一般含水量为62.5%-70%，干物质占30%-37.5%，干物质中，糖类占20%-39%，脂肪占7.5%-15%，矿物质占0.9%-3%，维生素占1%，此外还有无机盐、有机酸、酶、激素及其他生物活性物质[5]。 1.2.2 蜂王浆的化学成分 随着近年来理化分析技术的发展，对蜂王浆的生物理化特性以及对人体生命活动调节作用有了较为深入的认识。蜂王浆主要由蛋白质、脂类、糖类、碳水化合物、小分子物质（维生素、氨基酸、游离氨基酸等）等组成。 (1) 蛋白质 蜂王浆中的蛋白质有大约2/3是清蛋白，1/3是球蛋白，其含量比例与人体血液中的清蛋白、球蛋白比例基本相同。蜂王浆干物质中的水溶性蛋白质约占15%-20%，水不溶性蛋白质约占15%，透析性蛋白质约占16%-20%[5]。 (2) 氨基酸 蜂王浆中的氨基酸种类丰富，有20多种，包括人体必需的8种氨基酸，且多以游离氨基酸形式存在。12种游离氨基酸的含量约占干物质的0.8%。蜂王浆中还发现有调节生理功能的牛磺酸[6]，蜂王浆中总牛磺酸含量平均值为 20.89mg/100g，游离牛磺酸含量的平均值为14.09mg/100g，占牛磺酸含量的67.45%。蜂王浆中的牛磺酸的含量超过母乳(含牛磺酸3.3-4.6mg/10OmL)和牛乳(含牛磺酸0.7mg/100mL)。 (3) 糖类 蜂王浆中的葡萄糖占总糖含量的45%，果糖占52%，麦芽糖占1%，龙胆二糖占1%，蔗糖占1%。Ohashi分离到葡萄糖营酶，分子量约为70道尔顿，可能直接作用于保幼激素，而保幼激素是在诱导工蜂行为和咽下腺细胞作用的改变方面起重要作用[7]。 (4) 脂类 蜂王浆中的脂肪酸主要有皮脂酸15%，羟基癸烯酸25%，羟基癸烷酸5%，软脂肪酸5%，油酸5%，还有磷脂、糖脂、蜡、苯酚、胆固醇等。 (5) 维生素 蜂王浆中的维生素以B族维生素含量最丰富，包括B1、B2、B6、B12、叶酸、乙酞胆碱等。蜂王浆中含有乙酞胆碱93.8mg/100g。因为蜂王浆中含有抗坏血酸酶，所以其中的维生素C含量很低。此外还有烟酸、泛酸、肌醇、生物素等多种