08级3班-黄燕花-全脂奶粉中胆固醇的定性测量.docVIP

全脂奶粉中胆固醇的定性测量 黄燕花 广州医学院 广医三院临床三系（全科医学） 林名润 广州医学院 广医三院临床三系（全科医学） 张杰斯 广州医学院 广医三院临床三系（全科医学） 摘 要 以全脂奶粉为原料，根据蛋白质在无水乙醇中变形沉淀，而胆固醇可以溶于无水乙醇的原理，进行全脂奶粉中提取胆固醇于无水乙醇中的实验。然后根据胆固醇与磷硫铁试剂发生呈色反应，利用分光度计计算出全脂奶粉中胆固醇的含量。 关键词 全脂奶粉 胆固醇 提取 定性测量 1 前言 现代研究已发现，高胆固醇血症是引起动脉粥样硬化的重要原因，其引起的冠心病,脑卒中等心脑血管疾病已成为我国老年人的一大死亡杀手，给我国的经济造成极大的负担；高胆固醇血症还可增加静脉血栓形成的几率。并且可诱发胆石症给人类带来极大的痛苦。因此，胆固醇在食品类，医学中均引起高度的重视。 2 实验目的 我国老年人人口众多，常以奶粉补钙。但是奶粉中除了含有钙和蛋白质之外，还有一定量得胆固醇。随着年龄的增加同时也提高了动脉粥样硬化的发病率，在高危因素影响下在，再从奶粉中摄取过多的胆固醇将得不偿失。如何科学的指导饮用奶粉将可以补充所需的钙又可以避免增加胆固醇的摄取量以降低动脉粥样硬化的发病率。研究机构表明即使健康成人和不伴有冠心病或其它动脉粥样硬化病的高胆固醇患者，每天胆固醇的摄入量应低于300毫克。为此，本实验将测出常用奶粉中胆固醇的含量，以评估老年人是否适合饮用全脂奶粉来补钙。 3 实验原理 全脂奶粉经无水乙醇处理后蛋白质被沉淀、胆固醇则溶解在无水乙醇中。乙醇提取液与磷硫铁试剂反应后生成有色物质，其呈色度与胆固醇含量成正比，可于550nm波长下进行比色测定。利用标准液的浓度计算出全脂奶粉中含有胆固醇的量。 4 实验过程 4.1 实验设备和实验材料与试剂 4.1.1 实验设备 721型分光度计 台式离心机 具塞锥形瓶 试管若干 4.1.2 实验材料与试剂 A:1.0mg/ml的胆固醇储备液：将100.0mg胆固醇溶于100ml无水乙醇中。 0.02mg/ml的胆固醇标准液：取2ml胆固醇贮备液加98ml无水乙醇。 氯化铁溶液：将5.0g FeCl3.6H2O溶于200ml浓磷酸中。 磷硫铁试剂：取40ml氯化铁溶液用浓硫酸定容到500ml。 B:安怡全脂奶粉一包 4.2 实验方法 4.2.1 胆固醇的提取 取全脂奶粉2g溶于10ml的水搅拌至完全溶解； 取两支带帽试管，各加入0.1ml全脂奶粉液和10ml的无水乙醇，立即用力震荡20min 将两支试管于台式离心机上高速（3000r/min）离心5min。各取2.0ml上清液转移到相应的锥形瓶中。 取0.02mg/ml胆固醇标准液2.0ml转移到第三个锥形瓶中，用作标准液； 取2.0ml无水乙醇加入第四个锥形瓶中，用作空白。 向四个锥形瓶中缓慢加入2.0ml磷硫铁试剂，轻轻震荡均匀； 封住锥形瓶口，置室温30min，所产生颜色在1h内稳定。 将上述各锥形瓶中的有色溶液于550nm波长下进行比色测定，记录数据。 公式：C测=A测*C标/A标。 5 注意事项 浓硫酸具有强烈腐蚀性，操作必须规范，防止意外发生。 6 费用预算 安怡全脂奶粉一包30元，纯净胆固醇100mg70元（可否学校代购） 参 考 文 献 （1）鄢盛恺.关于临床血脂测定的建议[J].中华检验医学杂志, 2003, 26: 182-184. （2）袁秀英.心血管疾病预防与竹康宁[J].世界竹藤通讯, 2004, 2(2): 12-16.. （3）陈鋆. 两种血清总胆固醇测定方法的比较——酶法和硫磷铁法. 皖南医学院学报, 1987, (02). （4）/question/196017105.html （5）禹开喜, 牛桂兰, 王春连. 高密度脂蛋白胆固醇测定的影响因素. 医学临床研究, 1997, (S1) （6）陆九高, 郑玉兰. 红细胞胆固醇测定乙醇抽提——磷硫铁显色法. 临床检验杂志, 1986, (04) 附件1：? 广医生化技能大赛 报 ?名 ?表 参赛作品题目 全脂奶粉中胆固醇的定性测量 联系人（组长）资料 姓名 黄燕花 手机 所在系或专业 临床三系全科系 E-mail 参赛者资料（组长写在第一位） 姓名 性别 年级专业 宿舍 手机/短号 黄燕花 女 08全科 20-604 林名润 男 08全科 2-102 张杰斯 男 08全科 2-103 696440 注：请报名者务必注意，填写的联系方式