高级中学基础科学资优人才培育计画期末报告.pdfVIP

92 年度高級中學基礎科學資優人才培育計畫期末報告 一、新竹市豆漿品質之調查 二、激光後之蘆薈薄膜抑制細菌之探討 學生姓名:劉柔希 就讀學校:國立科學工業園區實驗高級中學 指導教授:毛仁淡教授 壹、 學習目的 一、 學習獨立操作實驗 二、 學習科學性的思考和合理的邏輯推論 三、 學習完整的將結果呈現及口頭報告的技巧 四、 從豆漿的蛋白質濃度測定了解蛋白質的組成 五、 了解實驗儀器的操作與原理 六、 對待實驗動物的基本態度 七、 學習微生物的實驗操作，包括細菌的培養，無菌操作台的使用 貳、 學習方法 一、新竹市豆漿品質之調查 (一) 樣品的準備： 每天早上在選定的十家豆漿店買冰豆漿，持續六天 。將豆漿加入 NaN3 ，抑制細菌的生長並存放在 -20℃的冰箱內。 (二) 密度： 各家豆漿各取一毫升，測量其質量並算出密度，比較其間密度的 差異。 (三) Lowry assay 和 UV absorbance Lowry assay 和 UV absorbance 兩種方法都是常見的蛋白質定量 方法。Lowry assay 是利用銅離子在鹼性環境下與胺基酸上的 C=O 結 構 結 合 ， 此 複 合 物 再 把 第 二 種 試 劑 — 磷 鉬 酸 - 磷 鎢 酸 試 劑 （phosphomolybdic-phosphotungstate）、斐林試劑（Folin′s）還原 成深藍色。 Lowry assay 需較多的時間。在磷鉬酸化複合物 （Folin-Ciocalteu′s試劑）中，苯酚（ phenol ）可以還原鉬 （molybdenum）。蛋白質的酪氨酸（tyrosine）殘基可提供酚基，而銅 92 年度高級中學基礎科學資優人才培育計畫期末報告 離子可提高反應靈敏性。因此，當用 Folin-Ciocalteu′s 試劑處理 後，蛋白質會有藍色反應，顏色深淺則依酪氨酸之含量而定。本實驗 使用的是 BioRad 提供的 DC protein assay，此法為改良後的 Lowry assay。 UV absorbance 也是一種用來定量蛋白質的方法。蛋白質骨架上 結構對特定波長有吸收值，芳香族胺基酸(Tyrosine, Tryptophan, Phenylalanine)對 280 nm 有極大的吸光。此法所需要的時間較短但 需要的樣品量較大。 我們以義美的豆漿作為標準品，以 Lowry assay 和 UV absorbance 得到蛋白質濃度與 OD280 吸光值的關係，最後我們就可以將樣品的 OD280 吸光值以內插法對回蛋白質濃度-OD280 的圖算得各家豆漿的蛋 白質濃度。之後比較家豆漿蛋白質濃度的差異及品管的好壞，探討連 鎖店與非連鎖店之差異。 二、激光後之蘆薈薄膜抑制細菌之探討 (一)蘆薈凝膠的製備： 由購自澎湖的吉拉索蘆薈 (Aloe vera) 植株，將新鮮的吉拉索蘆薈 以水洗淨，先削去蘆薈前、後端的部份，再以水果刀仔細削去蘆薈葉表 皮，取出蘆薈的果肉膠狀。此時將蘆薈的膠狀果肉直接以冷凍乾燥法昇 華其中的水份，所得的固體擠