通过精确质量确定元素组成从四极杆到傅立叶变换离子回旋共振质谱仪.PDFVIP

通过精确质量确定元素组成： 从四极杆到傅立叶变换离子回旋共振质谱仪 顾鸣，王永东 (思路生科，14 Commerce Drive, Danbury, CT 06810, USA) 利用质谱测定元素组成的方法已被广泛应用于各种领域研究，如：药物研发、药物代谢、环境研 究、法医、食品安全、香精香料、兴奋剂以及天然产物等。传统的观念认为，要测定元素组成，必须 获得高质量精度；而高质量精度只能从高分辨率质谱获得，如：TOF, Orbitrap或者FT ICR MS。 最新的傅立叶变换离子回旋共振质谱仪(FT-ICR MS)，其质量分辨率达到 800,000:1，通过它可以 得到＜200ppb的质量精度。但即使在如此高的质量精度下，仍然会存在好几个候选的化学式，必须依 靠我们去选择和推断。而在飞行时间质谱(TOF)上，典型的质量精度约为 5ppm，通常候选的化学式有 5～10个，加大了选择和推断的难度。而且不幸的是，在所有上述情况下，正确的结果往往不是质量误 差最小的候选化学式。所以仅仅依靠精测质量一个条件，不可能得到唯一可靠的化学式。但这些有着 非常近似质量的候选者由于元素组成不同而产生了不同的同位素分布，这个特点可用于进一步区分它 们。 过去，研究者通过调节峰的宽度，来模拟和假定一个同位素高斯分布，试图用这个高斯峰形来区 分上述的差异。但由于候选者彼此间同位素分布的差异极小（通常只有几个百分点），所以过去的方 法常常是失败的，除非化合物中存在特征元素如 Cl或 Br。 为了区分同位素分布之间的微小差异，发展了一种综合的、同时包括质荷比（m/z）校正和更为重 要的、峰形校正的方法，可以获取高精度的谱图，从而得到唯一的、正确的元素组成。而且，在低分 辨的四极杆或者三重四级类型质谱仪上，也可用这种校正方法来获得唯一确定的化学式。 1.理论 在质谱中，质量精度符合方程式 1 σ ∝ R S 其中，σ表示质量误差(ppm)；R表示质量分辨率，其定义为质量(m/z)除以半峰高处全峰宽 (FWHM)；S 表示离子信号强度，此时假定主要的噪音来源于离子计数噪音，因为硬件设计完好的质谱仪 符合这种假定。这个方程，推动着新型质谱仪的发展，因为更高的分辨率与更好的质量精度成正比。 另外，常规的质谱校正仅仅是进行质量轴的校准，没有考虑质谱峰形的校正，而质谱峰形的校正 对于可靠的质荷比测定以至于元素组成的确定也是至关重要的。下面我们将介绍的是一种新颖独特的 方法，通过这种全新的质谱校正方法，不仅对质量轴进行了校正，而且把峰形函数校正为已知的数学 峰形函数，这个峰形函数是可以根据已知标定离子的理论质量数和同位素分布推导出来。通过实际的 谱图与理论的谱图在数学上的对比，任何质量漂移以及峰形失真都可以得到校正并归纳为一个校正函 数。通过这个既有质量校正又有更为重要的峰形校正函数就可以获得甚至是低分辨下谱图的精确质量 数。 2.实验 + 未知化合物（m/z＝239 Da）同内标（m/z＝410 Da，C H N , 精确质量 410.4726Da）混合，然后 28 60 直接进样进入 Waters Quattro 三重四级杆质谱。Profile（轮廓）采集模式，扫描范围 50-550Da，采 作者简介：顾鸣，男，江苏新化人，博士 732-447-8864 ming.gu@ + 集 1分钟，共获得 57 个扫描，选择其中的 8 个扫描进行校正。使用内标 C H N 的已知离子做校正离 28 60