[理学]基础生化-2009-第十一章RNA合成.ppt

（二）真核生物的RNA聚合酶（P661） 功能分工 为了方便，将在DNA上开始转录的第一个碱基定为+1，沿转录方向下游的核苷酸序列均用正值表示；上游的核苷酸序列均用负值表示。　 （1）DNA模板上有终止信号富含GC/AT的回文结构 转录出来的RNA自身互补形成发夹状结构 （2）转录出来的RNA 3′尾端有≥4个U， （1）RNaseP (由蛋白质和RNA组成的复合体)可切除E.coli前体tRNA5′的前导序列（41nt）。该酶不识别特殊的序列，而是识别二级结构——发夹所组成的tRNA。 （2）去尾，形成3’－OH末端。由内切酶和外切酶共同参与 原核生物 rRNA以多顺反子的形式存在，还可能带有某些tRNA的基因。E.coli中rRNA有7个转录单位,每个转录单位含有16S、23S、5S rRNA 及一个或几个tRNA，rRNA前体的加工由RNase Ⅲ负责。 rRNA有几百个拷贝成簇排列。 5SrRNA单独作为一个单顺反子由聚合酶Ⅲ催化转录，做简单修剪即可。 5.8S、18S、28SrRNA作为一个多顺反子由聚合酶Ⅰ催化转录，需经过较复杂的剪切和修剪以及核苷酸的修饰。 某些生物如四膜虫和绒泡菌的rRNA前体还有内含子，因此还需要剪接过程。（不同于真核mRNA前体加工） 第三节 RNA复制 一、RNA复制 病毒RNA进入宿主细胞后，还可进行复制，即在RNA指导的RNA聚合酶催化进行RNA合成反应。 二、病毒RNA复制的主要方式 1．双链RNA病毒（带有复制酶）：轮状病毒等 以双链RNA为模板，在复制酶作用下：以(-)RNA为模板合成(+)RNA，以(+)RNA为模板合成(-)RNA和蛋白，组装病毒颗粒。 2.正链RNA病毒（mRNA）：噬菌体Qβ、灰质炎病毒等 进入寄主细胞后，利用寄主的翻译系统，(+)RNA充当mRNA，首先合成复制酶及有关的蛋白质，然后进行病毒RNA的复制，最后由病毒RNA和蛋白质装配成病毒颗粒。(+)RNA为模板，复制，合成(-)RNA，再以(-)RNA为模板合成(+)RNA组装成病毒颗粒。 3．负链RNA病毒（带有复制酶）：流感、麻疹病毒等 此类病毒带有复制酶，侵入后，复制酶首先合成出正链RNA（mRNA），再以正链RNA为模板，合成负链RNA及蛋白质，然后装配。 4．反转录病毒（含反转录酶）：白血病病毒、肉瘤病毒等致癌RNA病毒 正链RNA病毒，它们的复制需要经过DNA前病毒阶段。 二、简答 1. 复制与转录的异同点。 2.试述原核生物启动子的结构特点及功能 3. 原核生物转录终止的类型？ ⑴ 真核细胞每种转录产物都是各种RNA的前身，既无活性，亦无功能。必须在胞核内经过适当加工，使之变成具有活性的成熟RNA后，由胞核运至胞质才能执行翻译功能。 ⑵原核细胞mRNA不需加工，tRNA和rRNA加工。 ⑶ 真核细胞转录作用和翻译作用无论在空间上还是时间上都是彼此分开进行的。 真核细胞与原核细胞转录产物后加工的比较： 相同点： 二者tRNA和rRNA加工相似 不同点： 一、原核生物RNA的转录后加工 （一）原核生物mRNA前体加工 原核生物mRNA一般不稳定，很少经历加工，多数是边转录、边翻译。唯一的加工作用是多顺反子mRNA在RNaseⅢ的催化下，裂解为单独的顺反子。 （二）原核生物 tRNA 的加工 原核生物tRNA初始转录本有三种 （1）多数为多顺反子 （3）由tRNA和rRNA串联组成 （2）少数为单顺反子 原核生物有两种类型的tRNA基因： 具CCA序列 Ⅰ型 无CCA序列 Ⅱ型 Ⅰ型 tRNA 的CCA下游仍有一段序列，需在酶的作用下切除 Ⅱ型 tRNA需在酶的作用下添加CCA序列 RNaseP是一个核酶 tRNA两个末端的加工 （3）修饰。主要是碱基修饰，如通过甲基化酶，硫醇酶，假尿嘧啶核苷化酶等的作用进行修饰成为特殊的碱基 剪切 修剪 核苷酸修饰 原核生物tRNA前体的加工 碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） tRNA （三）原核生物rRNA 的加工 1.剪切和修剪 2.核苷酸的修饰（主要为核糖的甲基化，SAM作为供体） 二、真核生物RNA的转录后加工 （一） mRNA前体加工 　　 真核生物转录生成的mRNA要经过较复杂的加工过程。包括：①5′末端加帽 ②3′端加尾③剪接 ④核苷酸编辑 ⑤甲基化修饰。 1. 5′末端加帽 （1）帽子的种