纳米铝佐剂的生物相容性试验研讨.pdfVIP

7．006第五届中国(田际)蚋米科捆安研讨会论文集 2006 纳米铝佐剂的生物相容性试验 刘慧，张东生 (东南大学基础医学院病理学与病理生理学系，江苏南京，210009) 摘要：为评价自主研制的纳米铝佐剂生物安全性和生掳相客性。方瑶：选用建系的L929成纤维细胞进行细胞毒性试 验，溶血试验评价其有无溶血作用，小鼠腹腔注射其无酋混悬液以洲定其LD50及最大耐受ItMTO)．微核试睑评价 g,g-中纳米铝佐剂的溶血率为3．57％，小于5％，表明实验用纳米铝佐剂元溶血作用；昆明小鼠腹腔注射谊材料混悬 围。微棱试验结果表明纳米铝佐荆对小鼠骨髓微橱形成率与阴性对照组相比无显著差异、而与阳性对Jil【CTX组相比 有显著差异，可以认为谊材料无致畸或致突变作用．从本实验目前的研究结采来看，自制的纳米铝佐荆具有良好的生 物相客性，在肿瘤免疫治疗方面具有良好的应用前景． 关键词：纳米铝佐荆；生物相客性 0引言 自从1926年Glenny首先应用铝盐吸附白喉类毒素，铝佐剂已广泛用于人、兽疫苗。它为疫苗的免疫效应等诸多 方面的问题解决起到了重要作用，在提高抗体水平和安全方面已获得长期的实践证实。它的缺点是与许多重组合成的 多肽疫苗共同免疫时未能激发有效的免疫应答；不能诱导Thl型反应，干扰细胞免疫．使得疫苗的保护不全面；有一 些毒副作用。而机体的抗肿瘤免疫，是以Thl介导细胞免疫为主，这就大大限制了铝佐剂在肿瘤免疫治疗的使用。何 萍01等发现：用纳米铝佐剂免疫吸附I-IBsAg，相比于常规纳米铝佐嗣，体液免疫和细胞免疫都有增强。因此，纳米铝 佐剂应用于肿瘤免疫治疗具有一定的可行性。理想的佐剂应该以最小的免疫刺激引起适当的免疫反应，并有良好的生 物相容性。我们采用石炭化法法制备了纳米级ALOOtt作为自体肿瘤疫苗的佐剂，但其能否应用于人体，尚须对其生 物相容性进行检测，这也是医用生物材料能否走向临床医疗的关键[21。本文通过体外细胞毒性检测、溶血试验、LD∞ 的测定以及微核试验等对制备的纳米铝佐剂的生物相容性进行研究，以期为其今后在临床肿瘤治疗上提供可靠的理论 依据。 ， l材料和方法 I-1材料浸握液的细胞毒性实验 仁生物制剂公司)#RPM【1640培养基(GIBC,O)；古lo％小牛血清I， ． 矽继触 ·629· 7,ee6第五履中膏(胃蓐)精米辩技西安研讨套轮吏集 n犍神dh扫ofP№由ml咖蛔岫—呻nDN蛆o·咖∞矗h岫蛔；XPmn7．e06 反应，实验结果为0或1级反应为合格，实验结果为2级反应的结合细胞形态综合评价，实验结果为3～5级反应为 不合格。 囊1 RGR与细胞毒性分级转换表 毒性反应 相对增殖率(RGI鹳／o) 0级 ≥l∞ 1级 75-99 2级 50-74 3级 25-49 4级 1-24 5级 0 1．2溶血实验 上海精密科学仪器有限公司) 2)方法抽取新西兰兔血10 mL加入10 mL，加入20鲥草酸钾0．5‘札，按每8 mL生理盐水得到稀释的新鲜抗 凝兔血l将0．2mL兔血稀释液加入10