第二章_食用菌三级菌种制作技术文档.pptVIP

* ，选取组织的方法与平菇不同 * ，这个过程叫做转管或母种的扩大 * 接种用具要表面消毒，火焰灭菌，冷凉再用。 母种块约3mm见方，带1～2mm厚的培养基。 接种动作要尽量快。 由于组织分离等得到的菌种数量有限，为了扩大菌种量，允许转管３－４次，都叫母种。 * 原种培养基配方很多，常用主料有棉籽皮、木屑、谷粒等，辅料常用麸皮、白糖及石膏等。 切开后无白心， * ，注意绳要紧，面要松 * 　　影响温度分布的均一，否则局部温度低。 　　灭菌时，因锅中热蒸汽在锅壁四周和锅盖内侧容易产生凝结水，凝结水沿着锅壁和锅盖下流，弄湿棉塞。潮湿的棉塞在培养过程中，容易污染。因此 * 　　特别是管口处。 　　一般原种在适温下20－25天可发满， ，让菌丝充分积累营养，更加洁白、浓密。 * 　　如由20%减少到15%或由15%减少到10%， * 　　这样料面上的菌种同时往下生长，能明显缩短菌种长满袋的时间，而且能减少污染。 装瓶。常用容器为750ml罐头瓶或菌种瓶，每瓶装干料2.5～3两。料要装匀，松紧适度，装至瓶肩下1cm处，料面压平。 打洞封口。擦净瓶口，中央打直径2cm的孔至瓶底。用两层报纸和一层聚丙烯膜封口。打洞可增加料底透气性。 * * 灭菌：高压灭菌或常压灭菌。 常压灭菌：视灭菌量，需8～10h以上。注意：一是培养料量要适中，物品排列合理，保证蒸汽流通。二是大火猛烧，防止压力忽高忽低。三是灭菌后闷4～6h再出锅。 高压灭菌：1.4～1.5kg/cm2压力下灭1.5～2h，压力不稳或压力低时要延时。高压灭菌应注意： * 灭菌锅内冷空气必须排尽。否则会产生假蒸汽压。 培养基必须排放有序，蒸汽畅通。 灭菌完毕应缓慢减压。自然降温或缓慢排气，防止液体突然沸腾弄脏瓶塞，或瓶、袋胀破。 棉塞防湿。灭菌时棉塞不能接触锅壁，并盖报纸或防水纸，防止冷凝水打湿棉塞。 * * （二）原种的制作 场地消毒：将料瓶和用具放入接种箱熏0.5～2h。 接种：母种表面消毒后带入接种箱，点燃酒精灯，再次对试管外壁消毒。在灯焰范围内，用接种钩将母种分成4～6份，取一份放入料面中部，封口。两人合作既好又快。 培养：在适宜条件下培养。定期检查。菌丝长满后，再继续培养3～5天。 * * 三、栽培种制作技术 （一）栽培种培养基的制备 培养基配方：与原种培养基可以相同。 菌种袋规格：选用聚丙烯或高密度聚乙烯塑料袋。①17×32cm，一端开口，每袋装干料6两。②17×40cm，两端开口，每袋装干料1斤。 * 拌料装袋，注意： 料松紧度适宜；袋壁光滑。 料面要平，中间打孔，以利通气。 绳要绑紧，尽量排除袋内空气，防止涨袋。 灭菌：与原种相同。 * （二）栽培种的制作 场地消毒：同前。 接种方法：双手表面消毒后进入接种箱；原种表面消毒，放于三角架或空瓶上，瓶口表面消毒、火焰灭菌；用镊子把菌种扒成1-2cm小块，均匀接于料面，绑口。 * * 接种时注意： 接种过程应在酒精灯旁进行。 每瓶原种接栽培种10～15袋(两头接种)或50瓶左右。 接种用具使用前表面消毒，火焰灭菌。 接完种后，据接种量确定封口松紧度。 培养：同原种。 * 三级菌种生产的工艺流程 * 四、菌种污染原因及防止措施 （一）常见杂菌种类：细菌、酵母菌、放线菌和霉菌。 * * （二）污染原因及防止措施 培养基灭菌不彻底。表现为瓶壁和袋壁上出现杂菌菌落。原因：灭菌压力或时间不足，或者高压灭菌时锅内空气没有排尽。 措施：锅内空气排尽；保证灭菌压力和时间。 * 菌种带杂菌。表现为菌种块周围首先污染。 措施：选用纯正菌种。 接种操作中污染。污染点常分散在培养基表面。原因：接种时无菌操作不严格。 措施：接种场所及工具消毒、灭菌要彻底，接种操作在灯焰形成的无菌区进行，并要敏捷迅速。 * 培养室环境污染。培养室环境不卫生，或通风不良、潮湿等导致棉塞等封口材料受潮而污染。 措施：选择清洁、高燥的场地作菌种培养室。 破口污染。灭菌操作或运输中不小心，使容器破裂或出现微孔而污染。 措施：灭菌操作或运输中要轻拿轻放，所用器具不能带毛刺。 结 束 * 本章重点 菌种的本质，三级菌种的概念。 三级菌种的制作方法以及制作过程中应注意的问题。 常用的消毒、灭菌方法。 结 束 * 复习思考题 什么是菌种？ 什么是三级菌种？为什么要制作三级菌种？ 消毒和灭菌的概念？常用消毒、灭菌方法有哪些？ 如何提高制种的成功率和菌种质量？ 菌种制备过程中常见的污染原因及防止措施有哪些？ * * 通常分三级。 又叫一级菌种或试管种，常用接种量：1只母种→4-6瓶原种。又叫二级菌种或瓶装种，每瓶原种→约20袋栽培种（两头接种时为10-15袋）→栽培袋（熟料栽培的接种量为3%-5%，生料栽培的接种量为5%-10%）。 又叫三级菌种或袋装种， 　　是指杀死一部分微生物。是指