8-药敏试验质量控制及2011CLSI新变化.pdf

药敏试验质量控制及2011 药敏试验质量控制 CLSI新变化 山东省立医院 金炎 2011.8.25 何时需进行细菌的药敏试验？ 何时不需进行细菌的药敏试验？ 何时需进行细菌的药敏试验？ 何时不需进行细菌的药敏试验？ 当一细菌是需要抗微生物药治疗的某感染过程 • 若感染的性质不清楚、标本含数种混合生长的菌 的病原菌，而其敏感性不能从细菌的种属特性 或正常菌群，而且这些菌与正在治疗的感染关系 可靠地推知时，就需要进行药敏试验。 很小时，通常不必作药敏试验，因为其实验结果 可能有误导作用。 当病原菌被认为是属于对常用抗生素能产生耐 药的菌种时，更需进行药敏试验。 • 若感染是由公认的对高效药物敏感的微生物引 起，就很少需要作药敏试验。 药敏试验的种类 －纸片扩散法 • 纸片扩散法 • MIC法： 试验原理 1、稀释法：宏亮肉汤稀释法、微量肉汤稀 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板 释法，琼脂稀释法 上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后不断向纸片周 2、E-test 法 围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内测 试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌 圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测试药物的敏感程度，并与 该药对测试菌的MIC呈负相关。 1 －纸片扩散法 影响因素 试剂 培养基 Mueller-Hinton琼脂培养基 接种菌量 抗生素含量、扩散性 抗生素药片 温度、预孵育时间 接种物（细菌悬液） －纸片扩散法 －纸片扩散法 • MH平皿的标化 • 接种物的标化 • （1）厚度4mm • （2 ）pH7.2－7.4 （pH过低，氨基糖苷类与大环内脂类失活，青霉素类 （1）接种物制备：生长法（肉汤增菌） 活性增强） 直接菌落悬滴法（检测苛养菌的推荐方法） • （3 ）湿度 • （4 ）胸腺嘧啶核苷或胸腺嘧啶（TMP/SMZ-ATCC29212,抑菌圈≥20mm ） （2 ）0.5麦氏单位浊度（对于大多数细菌：1-2×108CFU/ml) • （5 ）二价阳离子含量：影响氨基糖苷类对绿脓杆菌、四环素对所有细 菌的实验结果。过低，活性增强；过高，活性减弱）