PCR技术新进展及应用.docVIP

PCR技术的新进展及应用 【摘要】PCR技术分子生物学领域的一项里程碑。之后许多研究人员充分发挥创造性思维的 能力 ,对PCR 的程序进行 了改进 ,设计开发了标记PCR、加端PCR、定量PCR、免疫PCR、连接酶链式反应、PCR-SSCP分析技术等一系列新式PCR技术和新用途。在许多疾病的诊断研究方面 ,特别是肿瘤的早期诊断、疗效观察以及癌基因与肿瘤的关系方面 ,做出 了巨大的贡献。 【关键词】PCR技术 新进展 应用 聚合酶链反应或多聚酶链反应（Polymerase Chain Reaction, PCR），又称无细胞克隆技术(“free bacteria”cloning technique)，是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。该方法一改传统分子克隆技术的模式，不通过活细胞，操作简便，在数小时内可使几个拷贝的模板序列甚至一个DNA分子扩增107～108倍，大大提高了DNA的得率。PCR技术最早由美国Cetus公司人类遗传研究室Kary Mullis及同事于1985年发现并研制成功的；最早的应用报道是Saiki等1985年将PCR技术应用于β-珠蛋白基因扩增和镰刀状红细胞贫血的产前诊断。随后使用了1976年Chien等分离的热稳定性Taq DNA聚合酶，使PCR操作大为简化，并使PCR自动化成为可能。PCR技术作为一种方法学革命，必将大大推动分子生物学各有关学