peg5000修饰后假丝酵母尿酸酶的基本特性.docVIP

PEG5000修饰后假丝酵母尿酸酶的基本特性 作者：孙晓军 金磊 甘志勇 刘冬 【摘要】 　　目的 研究天然尿酸酶与PEG化尿酸酶的基本特性，为治疗高尿酸血症相关疾病药物做基础研究。方法 用相对分子量5 kD,活化基团为羟基琥珀亚氨的PEG作为专一性修饰剂对尿酸酶进行修饰，采用常规酶学分析方法，分别研究天然尿酸酶与PEG化尿酸酶的动力学参数，并比较修饰前后对抑制剂黄嘌呤的敏感性、最适温度、最适pH值、37℃时的稳定性以及在体半衰期等方面的差异。结果 经PEG修饰后尿酸酶最适温度由30℃升为35℃，最适pH无改变仍为pH8.7；在37℃水浴下,24 h后活性保留由40%增至70%，酶稳定性提高，体内半衰期由45 min延长至11 h；测定尿酸酶和PEG化尿酸酶的Km分别为32.40、36.34 μmol/L，黄嘌呤对尿酸酶与PEG化尿酸酶抑制常数分别为4.72、11.30 μmol/L。结论 假丝酵母尿酸酶经PEG 5 kD修饰后有药用潜力。 【关键词】 高尿酸血症；尿酸酶；PEG修饰；稳定性 　　【Abstract】 Objective To research the basic characteristics of natural uricase and PEGuricase, prepare PEGuricase, modify the Candida