[理化生]62 基因工程.ppt

6.1 基因工程及其应用 基因工程：即 。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里， 地改造生物的 。 DNA连接酶的作用过程 第一步： 基因工程的基本操作步骤： 目前，大多数专家认为，已经投入商品化生产的转基因番茄、玉米等农产品都是安全的。迄今为止尚无食用转基因生物产品引起任何严重问题的科学报道。 质粒的特点 1、细胞染色体（或拟核DNA分子）外能自主复制的小型环状DNA分子； 2、质粒的存在对宿主细胞无影响； 3、质粒的复制只能在宿主细胞内完成。 如何让大肠杆菌生产人胰岛素？ 科学家将携带抗虫基因的运载体导入二倍体棉花细胞中,经培养、筛选获得一株有抗虫特性基因的植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作杂合子。得到的棉花新品种对棉铃虫毒杀效果高达80-100%。 该资料中，杂合子抗虫棉个体在自交F1代中，理论上仍具有抗虫特性的植株占总数的 。原因是 。 该项科技成果在环境保护上重要作用是 。 随 练习 3/4 雌、雄配子各有1/2含抗虫基因 减少农药对环境的污染 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 ①从细胞中分离出DNA ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ②限制酶截取DNA片断 ③分离大肠杆菌中的质粒 ④ DNA重组 ⑤将重组质粒转入大肠杆菌 ⑥培养大肠杆菌 * 原 理： 操作水平： 结 果： 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。 基因拼接技术或DNA重组技术 定向 遗传性状 二、基因操作的工具 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因: 黏性末端 限制性内切酶 限制性内切酶 限制性内切酶 （EcoRⅠ） 1.基因工程的剪刀---- 1、基因工程的剪刀 指“ 限制性内切酶 ” 微生物 一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割 已发现的有200多种 种类: 来源: 特点: “ ” 这个特点说明了： 酶具有专一性 例如：大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 2：基因工程的针线 指“DNA连接酶” “ ” 作用： 连接“梯子”断口的“扶手”而非“梯子”中间的“踏板”。 其作用与限制性内切酶相反，作用位置相同 点击播放 将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 连接酶的作用： 作用位置：脱氧核糖与磷酸之间的缺口（磷酸二酯键）。 B、 条 件： 1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存 2、具有多个限制酶切点（每种限制酶切点最好只有一个），以便与外源基因连接 3、具有标记基因，便于进行筛选 A、常用载体： 质粒、噬菌体和动、植物病毒等 3、基因的载体 标记基因，便于进行检测。 其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.　 C、载体的共同点： 都有侵染或进入宿主细胞的能力 三、基因工程基本步骤： 获取目的基因 是指获得人们所需要的特定基因。如：抗虫基因，抗病基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等等。 注意：要保持基因的完整性 获得目的基因的主要途径： 一是：从供体细胞的DNA中直接分离目的基因。 二是：人工合成目的基因。 第二步： 目的基因与运载体结合 基因工程基本步骤： 　　用与提取目的基因的同一种限制酶切割质粒（运载体）使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA