[生物学]6 第六章病毒与原核生物的遗传学分析.ppt

第一节 细菌和病毒研究的遗传学意义 第二节 噬菌体（病毒）的遗传学分析 第三节 细菌的遗传分析 感受态（competence)：细胞具有吸收外源DNA能力的生理状态。 有些细菌在生长过程中会自发地产生感受态，如肺炎双球菌，枯草杆菌等；有些细菌不会自发地产生感受态，必需经特殊处理才可产生感受态，如大肠杆菌。 利用转化进行基因定位 实验（例子）： 　Nester利用枯草杆菌trp2+ his2+ tyr1+ DNA为供体，对trp2- his2- tyr1- 进行转化 Hfr菌株 当F因子重组在宿主细胞染色体上时，F因子仍然可以发生转移，此时的转移可推动宿主基因的转移，因此这种菌株称为高频重组菌株（high frequence of recombination, Hfr) F因子推动染色体的转移是以F因子的一端开始，沿F因子所处位置的相反方向进行转移，F因子最后才转移。所以染色体在F因子的推动下发生的转移具有一定的方向和顺序。 1954年利用Hfr菌株的染色体转移特征（方向性和顺序性），进行了E.coli染色体的基因定位。 Hfr: thr+ leu+ Azs T1s lac+ gal+ strs（供体） F-: thr- leu- Azr T1r lac- gal- strr （受体） 让两种细胞混合，37℃水浴一定时间后取样，组织捣碎机中断杂交，而后涂布在含Str的基本培养基上，考察供体基因在受体细胞出现的时间及顺序（基因转移的时间及顺序）。 8 8.5 9 11 18 25 thr leu Az T1 lac gal E.coli的染色体图 E.coli的基因定位主要以中断杂交的方法进行的，所以E.coli的染色体图是以分钟作单位的。 二、噬菌体杂交与基因定位 噬菌体的杂交方法：混合感染（复感染、双重感染） 重组合 重组频率= x 100% 重组合+亲组合 例： 1955年 Kaiser 的λ噬菌体实验 + + + x s mi co1 杂交 s：小噬菌斑，mi：微小噬菌斑，co1：中央浑浊小点的噬菌斑。 8.2 6.16 3.76 2091 合计 √ √ 0.86 18 5 13 s + mi + co1 + √ √ 5.3 112 61 51 s co1 + + + mi √ √ 2.9 62 30 32 s + + + co1 mi 90.8 1899 975 724 + + + s co1 mi s-mi co1-mi s-co1 百分比 合计 数目 类型 作图： 3.76 6.16 s co1 mi 8.2 + 2 x 0.86=9.92 1928年Griffith 的实验 1928年Griffith发现肺炎双球菌的转化现象。1944年Avery证实转化因子是DNA。 转化（transformation)：外源DNA通过细胞吸收过程进入细胞，并使其发生遗传改变的过程。 遗传转化的机理 利用转化进行基因定位 遗传转化的转化因子一般在10000~20000bp之间，因此当两个基因连锁（注意：这里的连锁与真核生物的连锁不完全一样）,他们被同时转化（共转化）的频率要远高于不连锁的基因 利用共转化的特点，可以对连锁的基因进行基因定位。 例：Nester利用枯草杆菌trp2+ his2+ tyr1+ DNA为供体，对trp2- his2- tyr1- 进行转化。 * * 第六章 病毒与原核生物的遗传学分析 优点： 生活周期短 单倍体，无显隐性关系 研究方法简单 灵敏度高 *