[生物学]两水相萃取.ppt

两水相体系形成 两水相的形成分子之间作用力（1）A-A A-B 相分离（2）A-AA-B 混合（3）A-BA-A 凝聚复合 混溶性疏水梯度 两水相体系类型 (1) 高聚物-高聚物（PEG-Dextran）易于 与后续处理连接 (2) 高聚物-盐 (PEG-(NH4)2SO4 ) 盐浓度 高，蛋白质易盐析， 废水处理困难 杠杆定律 19.3 双水相萃取过程的理论基础 表面自由能的影响 表面电荷的影响 表面积 电荷 思考题 1 理解概念：双结线，系线，结点，临界点，道南效应。 2 从分子相互作用的机理出发，理解两水相体系的形成。 3 在两水相加入无机盐如何影响物质的分配？ ? 两水相萃取 第二讲 19.4 影响分配的因素 (1) 聚合物组成的影响 Dextran 分子量（粘度高，价格）。 PEG分子量 (2) 聚合物浓度影响 密度，密度差，粘度，粘度差，表面张力。 上述参数随聚合物浓度变化。 （3）盐与缓冲液 A 盐离子的不均匀分配改变两相间电位差 B 高盐浓度引起盐析效应 （4） pH lgKi*=lgKi+γZi , 等电点测定 （5） 温度的影响(离开临界点远，不太敏感，粘度) （6） 荷电成相聚合物 低盐浓度对蛋白质分影配的 高盐浓度对蛋白质分配的影响 等电点测定 19.6 双水相系统的应用 (1) 蛋白质纯化 (2) 酶相转移催化 (3) 小分子分离 A 氨基酸 B 有机酸 B 抗生素 C 天然植物成分 工艺方面的问题 两水相分离条件 （1） 目的分子与细胞应分配在不同的相 （2） 分配系数应足够大 （3） 离心机容易分离 19.7 成相聚合物的回收 (1) 压力敏感型两水相 (2) 热促相分离高聚物EO-PO (3) pH敏感型高聚物（聚两 性离子高聚物，多聚 电解质) 相体系回收示意图 19.8 两水相萃取过程的放大与设备 特征： A 相粘度 （与传质及相分离有关） B 低表面张力 （选择搅拌与混合装置） 19.9 两水相技术研究进展 (1) 廉价相体系的开发 (2) 两水相萃取转化 (3) 亲和两水相 思考题 1 两水相萃取应用中最突出的问题是什么？ 如何解决？ 2 在两水相进行生物催化反应有何意义？ 3 两水相萃取生物小分子与萃取大分子有何 不同之处？4 影响生物分子在两水相中分配的因素有哪 些？ 实例 萃取反应示意 PEG 分子量对7-ADCA分配的影响 7-ADCA and cephalexin 盐的影响 系线长度的影响 添加剂的影响 两水相中与单水相中的反应比较 * * . 19 两水相萃取 19.1 概述 特点 （1）保留生物分子活性（2）除细胞碎片（3）表面张力低，耗 能少（4）成本高（5）大分子及小分子萃取 相图 双结线，上相（T，轻相）下相（B，重相）结点临界点系线 相 图 Donnan 效应 葡聚糖分子量对蛋白质分配影响 PEG 分子量对蛋白质分配的影响 无机盐对分配的影响 压力诱导相分离 热诱导相分离 pH 诱导相分离