[医学]分子生物学-表达调控1.pptVIP

分子生物学 第六章 基因的表达与调控(上) ——原核基因表达调控模式 基因表达调控的基本概念 原核基因调控机制 乳糖操纵子 色氨酸操纵子 其他操纵子 转录后水平上的调控 第一节 基因表达调控的基本概念 二、基因表达的方式 1、组成性表达(constitutive expression) 适应环境、维持生长和增殖（原核、真核） 维持个体发育与分化（真核） 1、转录水平上的调控（transcriptional regulation） (一)根据操纵子对调节蛋白（阻遏蛋白或激活蛋白） 的应答，可分为：正转录调控和负转录调控 第三节 乳糖操纵子(lactose operon) 一、乳糖操纵子的结构 ④当阻遏物与操纵基因结合时，lac mRNA的转录起始受到抑制。 三、乳糖操纵子的影响因子 2、大肠杆菌对乳糖的反应 培养基：甘油 按照lac操纵子本底水平的表达，每个细胞内有几个分子的β-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷透过酶； 诱导物的加入和去除对lac mRNA的影响 3、阻遏物lac I基因产物及功能 Lac 操纵子阻遏物mRNA是由弱启动子控制下组成型合成的，每个细胞中有5-10个阻遏物分子。 当I基因由弱启动子突变成强启动子，细胞内就不可能产生足够的诱导物来克服阻遏状态，整个lac操纵子在这些突变体中就不可诱导。 4、葡萄糖对lac操纵子的影响 如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中， lac操纵子处于阻遏状态，不能被诱导；一旦耗尽外源葡萄糖，乳糖就会诱导lac操纵子表达分解乳糖所需的三种酶。 代谢物阻遏效应 五、Lac操纵子中的其他问题 1、A基因及其生理功能 β-半乳糖苷酶：透过酶：乙酰基转移酶=1：0.5：0.2 3、操纵子的融合与基因工程 第四节 色氨酸操纵子（trp operon） 色氨酸操纵子的结构 色氨酸操纵子的阻遏系统 色氨酸操纵子的弱化机制 三、trp 操纵子的弱化机制 1、弱化子 细菌通过弱化作用弥补阻遏作用的不足，因为阻遏作用只能使转录不起始，对于已经起始的转录，只能通过弱化作用使之中途停下来。阻遏作用的信号是细胞内色氨酸的多少；弱化作用的信号则是细胞内载有色氨酸的tRNA的多少。它通过前导肽的翻译来控制转录的进行，在细菌细胞内这两种作用相辅相成，体现着生物体内周密的调控作用。 第五节 其他操纵子 一、半乳糖操纵子(galactose operon) 二、阿拉伯糖操纵子（arabinose operon) araB基因、araA基因和araD, 形成一个基因簇，简写为araBAD ，调控基因是araC,其转录方向与araBAD相反。 三、阻遏蛋白LexA的降解与细菌中的SOS应答 第六节 转录后水平上的调控 一、翻译起始的调控 RBS（核糖体结合位点）：mRNA链上起始密码子AUG上游的一段非翻译区。 RBS的结合强度取决于SD序列的结构及其与起始密码子AUG之间的距离。 SD- 4-10（9）-AUG 二、稀有密码子对翻译的影响 几种蛋白质中异亮氨酸密码子使用频率比较 TrpB –谷氨酸- 异亮氨酸-终止 GAA -- AUC -- UGA -- UGG -- AA AUG -- GAA 甲硫氨酸 – 谷氨酸–trpA 四、反义RNA的调节作用 与mRNA互补的RNA序列称为反义RNA 五、魔斑核苷酸对翻译的调节 ppGpp和pppGpp在色谱上检出斑点，称为魔斑核苷酸 The Lac Operon:When Lactose Is Present But Not Glucose 原核生物基因表达的调控 乳糖代谢基因表达调控图解：(没有乳糖时) Ｒ Ｐ Ｏ lacZ lacY lacA 调节基因 启动子 操纵基因 结构基因 RNA聚合酶 信使RNA 转录 翻译 阻抑物与 操纵基因 结合，结 构基因转 录受阻． 阻抑物 原核生物基因表达的调控 乳糖代谢基因表达调控图解：(有乳糖时) Ｒ Ｐ Ｏ lacZ lacY lacA 调节基因 启动子 操纵基因 结构基因 RNA聚合酶 信使RNA 转录 翻译 阻抑物与乳糖结合后构象发生了改变， 因而不能与操纵基因结合，使得结构 基因进行转录。 阻抑物 乳糖 转录 半乳糖苷酶 酶 酶 乳糖分解代 谢调控过程 是一个自我 调控过程 组成型突变： lacO