综述·生物低温在生物样本库中的应用-实用器官移植电子杂志.PDFVIP

·476· 《实用器官移植电子杂志》  2017年11月第5卷第6期  Prac J Organ Transplant（Electronic Version）， November 2017，Vol.5，No.6 ·综述· 生物低温在生物样本库中的应用 张园园，李灵溪 （金西盟低温生物研究院，国际低温生物协会，北京 100070） 欧美已经有很多大规模的样本库，而生物样本 以在低温下长期存活，但生物体在降温和复温过程 库近几年在中国也开展得如火如荼。随着生物和医 中极易遭受损伤而死亡。此过程中包括3个主要的 学技术的快速发展，建立一个专业、高效及管理有 物理化学过程，即液体溶液的固化过程、固化溶液 序的生物样本库以存储和利用人类丰富的样本资源 的融化过程和水分通过细胞膜的渗透过程。由此引 已成为众多国家保存人类遗传多样性的重要方式。 起的溶液冰晶形成和生长、冰晶的再结晶、高渗 而生物低温在样本库中的应用非常广泛。低温 压应力和溶液的高浓度毒性等因素均会损伤细胞。 生物学是研究低温对生物体所产生的影响及其应用 因此，若不进行特殊的控制，绝大多数生物体在经 的学科，样本通过在低温环境下长期存储，在被需 历低温和复 ［3-4］ 温时会因损伤而死亡 。 要时可以得到很好地复苏，从而实现储存样本的应 不同的生物体要求不同的低温处理程序，包括 用意义。本文针对生物低温在样本库中的应用进行 在保存溶液中加入和取走某些特殊的抗冻剂和特殊 了介绍。 的降温、复温程序。目前，人们已经能够将人体血 生物样本库是指一个集中保存用于疾病的临床 液、精子、胚胎、胰岛、角膜、皮肤、甲状旁腺、 治疗和生命科学研究的各种人类生物材料的生物应 白细胞及骨髓细胞等成功进行低温保存，但是基 用系统。生物样本库涉及的样本类型及相关信息 本都是简单的细胞，组织保存也是保存其中最主 主要包括健康和疾病生物体的生物大分子、细胞、 要的细胞，而对于更为复杂的细胞、组织和器官， 组织和器官等。根据存储的样本类型，生物样本库 甚至是人体等实现低温保存，还需要更深入地研究 可分为基因库、细胞库、组织库及器官库等［1］ 低温损伤机制，采用新的技术，探索新的保存程序。 。 生物样本库按照其流程及功能，通常分为3个 就如近期出现的国内首例人体冻存的例子，1例 部分：样品处理、样品存储及样本库的信息化管理。 49岁的癌症患者死亡后，其遗体被程序降温并用 1 生物低温在样本处理中的应用 液氮冻存。这个案例在国内引起了很大的轰动， 迄今为止，人们采用的低温保存方法都是将 但据中科院专家表示，就目前的技术而言，冻存器 细胞或组织置于含抗冻剂的水溶液中进行降温和 官还未成功，冻存遗体可能很难实现。至于50年后， 复温。在细胞内部也富含多组分的水溶液，因此， 甚至100年后，该例患者是否会成功复活，却为我 研究在冷冻过程中细胞内部的变化以及抗冻剂在此 们画了一个问号，也需要行业人士继续对人体的冻 过程中的作用为样本处理提供了强有力的保障。 存和复苏有更加深入的研究。 真正实现低温保存是在 1949年，当时生物学 1.1 低温保存的两种方法 家在偶然的情况下发现加甘油的精子可以经