考研必备《微生物》第六章微生物的生长繁殖及其控制.pptVIP

第六章 微生物的生长繁殖及其控制 商品化的测定方法 用于菌落计数的小型纸片或密封琼脂板 原理：活菌指示剂TTC，可使菌落染成玫瑰红 第二节 微生物的生长规律 一、微生物的个体生长和同步生长 （二）获得同步生长的方法 1.环境条件诱导法 用氯霉素抑制细菌蛋白质的合成； 细菌芽孢诱导发芽； 藻类细胞的光照、黑暗控制； 用EDTA或离子载体处理酵母菌； 短期热休克（40℃）法。 二、单细胞微生物的典型生长曲线 生长曲线：定量描述液体培养基中微生物生长规律的实验曲线 活细胞检测 ①生长速率常数等于零； ②细胞形态变大或增长； ③细胞内RNA尤其是rRNA含量增高， 原生质嗜碱性强； ④合成代谢十分活跃，核糖体、酶类和ATP的合成加速，易产生各种诱导酶； ⑤对不良环境条件敏感，对外界理化因素的抵抗力降低。 3.延滞期出现的原因 ①接种龄 即“种子”的群体生长年龄； ②接种量 ③培养基成分 1.指数期的特点： ①生长速率常数R最大，因而细胞每分裂一次所需的时间—代时（G）或原生质增加一倍所需的倍增时间最短； ②细胞进行平衡生长，故菌体内各种成分最为均匀； ③酶系活跃，代谢旺盛。 2.指数生长期中的三个重要参数 （1）繁殖代数（n） x2 = x1. 2n： x1和x2为时间t1和t2时的细胞数； n 为繁殖代数 （2）生长速率常数（R） （3）代时（G） 3.影响指数期微生物代时长短的因素： ①菌种： 不同菌种的代时差别极大； ②营养成分： ③营养物浓度： 营养物的浓度可影响微生物的生长速率和总生长量； ④培养温度： 温度对E.coli 代时的影响 4.应用 代谢、生理研究的良好材料 增殖噬菌体的最适宿主 发酵工业中作种子的最佳材料 1.稳定期的特点： ①生长速率常数R等于0，即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等， 或正生长与负生长相等的动态平衡之中。 ②开始合成抗生素等次生代谢产物； ③细胞开始贮存糖原、异染颗粒和脂肪等贮藏物； ④多数芽孢杆菌在稳定期开始形成芽孢。 2.稳定期的菌体产量与营养物质消耗之间的关系： 在稳定期菌体产量达到了最高点，而且菌体产量与营养物质的消耗间呈现出一定的比例关系，这一关系就是生长量常数Y（或称生长得率）。 3.稳定期到来的原因： ①营养物尤其是生长限制因子的耗尽； ②营养物的比例失调，例如C/N比值不 合适； ③有害代谢产物的积累，如酸、醇、毒素、H2O2等代谢产物都对自身生长有抑制作用； ④pH、氧化还原势等物理化学条件越来越不适宜。 4.应用 生产菌体与菌体生长相平行的代谢产物为目的的发酵生产的最佳收获期 维生素、碱基、氨基酸等物质进行生物测定的最佳时期 对稳定期的研究，促进了连续培养原理的提出和工艺、技术的创建 （四）衰亡期 decline phase ①个体死亡的速度超过新生的速度，群体呈负生长； ②细胞形态多样，常可见畸形和衰退型的细胞； ③有些微生物因蛋白水解酶活力的增强发生菌体自溶； ④有些微生物在衰亡期产生或释放对人类有用的次生代谢产物，如氨基酸、转化酶、外肽酶、抗生素等。 ⑤产芽孢杆菌在此期释放芽孢。 2.衰亡期产生的原因： 外界环境对继续生长越来越不利，从而引起细胞内的分解代谢大大超过合成代谢，继而导致菌体死亡。 三、微生物的连续培养 分批培养：将微生物置于一定容积的培养基中，经过培养生长，最后一次收获的培养方式。 连续培养：当微生物以分批培养的方式培养到指数期的后期时，一方面以一定的速度连续流入新鲜培养基，另一方面，以同样的流速不断流出培养物。培养物可达到动态平衡，其中的微生物可长期保持在指数期的平衡生长状态和稳定的生长速率上。 连续培养器类型 1.恒浊器 这是根据培养器内微生物的生长密度，并借光电控制系统来控制培养液流速，以取得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。 四、高密度培养 高密度培养（high cell-density culture, HCDC）又称高密度发酵，是指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常规培养10倍以上时的生长状态和培养技术。 选取最佳培养基成分和各成分含量：C/N比 补料：逐量流加 提高溶解氧的浓度：纯氧培养 防止有害代谢产物的生成：乙酸 第三节 影响微生物生长的主要因素 影响微生物生长的主要环境因素： 温度 氧气 pH 水 营养物质 一、 温度 最适生长温度 又叫最适温度（optimum growth temperature）某微生物分裂代时最短