江南大学抗生素发酵的代谢与控制.pptVIP

第八章 抗生素发酵的代谢与调控生命科学学院胡庆森 8.1抗生素产生菌的代谢与调节 8.2青霉素和头孢霉素的生物合成途径及其代谢调节机制 8.3选育青霉素生产菌的方法 菌体合成代谢的产物可根据它们与菌体生长、繁殖的关系分为初级代谢产物和次级代谢产物。 初级代谢产物是指微生物产生的，生长和繁殖所必需的物质，如蛋白质、核酸等。 次级代谢产物是指由微生物产生的，与微生物生长、繁殖无关的一类物质。 次级代谢产物生物合成至少有一部分是和与初级代谢产物无关的遗传物质有关，同时也与这类遗传信息产生的酶所控制的代谢途径有关。 抗生素、色素、毒素等是与初级代谢产物(如氨基酸、核酸)相对产生的次级代谢产物。 抗生素的合成代谢途径比氨基酸、糖代谢复杂得多，但与初级代谢产物有着密切的联系。 ③正亮氨酸和Met的作用机制相同，它们作为一种调节物对头孢霉素C的合成起促进作用 头孢霉素C 相对产量 培养基中Met含量 正亮氨酸 正亮氨酸也能诱导菌丝体分节为节孢子 8.1.8 选育青霉素生产菌的方法 1、出发菌株的选择 主要是产黄青霉（P.Chrysogenum ）51-20和点青霉 （P. notatum） 发酵单位：几十个单位 发酵单位：原种发酵单位：原种→100U/mL；诱变诱变→30000U/mL 2、切断代谢之路 （1）菌株的初级代谢和次级代谢处于分支代谢途径时， 初级代谢产物的营养缺陷型突变株可使相应的次级代谢产物 增加产量。 Leu-突变株，青霉素产量提高四倍 （2）青霉素的合成收到Lys的反馈抑制（抑制高柠 檬酸合成酶），选育Lys -突变菌株，并在培养基中限量添加Lys 3、切断菌体自身的反馈调节 （1）选育结构类似物抗性突变株 Leu结构类似物 三氟亮氨酸 （2）筛选自身耐受性突变株 不同菌株自身对产物耐受性不同，耐受性突变株可能是由于产物对合成途径中某一酶的反馈抑制被解除。 青霉素V 实例： 筛选抗青霉素V的菌株 产量提高到40000 U/mL (3)筛选前体或前体结构类似物抗性突变株 选育毒性前体（或其结构类似物）抗性突变株，可以消除 它们对生物生长与产物合成的抑制作用，提高产物合成。 苯乙酸或苯乙酰胺 青霉素V ：选育耐13 g/L的苯氧乙酸突变株，产量可达到50000U /mL 同理，可以选育苯乙酸或苯乙酰胺抗性突变株来提高维生素G的产量 8.1 抗生素产生菌的代谢与调节 抗生素是生物包括微生物、动、植物在内在其生命活动过程中，所产生的或由其它方法获得的，能在低微浓度下有选择性地抑能或影响其它生物机能的有机物质。 8.1.1 次级代谢产物和初级代谢产物的关系 ① ② ④ ⑤ ⑥ ⑤ ⑤ ⑤ ③ 从生化角度讲，由初级代谢产物衍生为次级代谢产物的基本途径： ①葡萄糖碳架掺入途径 ②莽草酸途经 ③与核苷有关的途径 ④聚酮体和聚丙酸途径 ⑤氨基酸衍生途径 ⑥甲羟戊酸途径 ⑦其他复合途径 初级与次级代谢都受到微生物的代谢调节，在调控上相互影响。因此在研究次级代谢时候，必须考虑初级代谢。次级代谢中所涉及到的酶常常与初级代谢的酶不完全一致。 从遗传代谢观点看，两种代谢都受到核内DNA调控， 次级代谢产物还受到与初级代谢产物生物合成无关的遗 传物质的控制。 质粒产物 8.1.2 抗生素产生菌的几种主要调节机制 1、诱导调节 2、反馈调节 3、碳分解代谢物调节 4、氮分解代谢物调节 5、磷酸盐的调节 6、细胞膜透性的调节 1. 诱导调节调节 在次级代谢过程中，有些参与次级代谢产物合成的酶为 诱导酶，如链霉素生物合成中的转脒基酶、甘露糖链霉素酶等。 诱导酶需要有诱导物存在才能形成。诱导物起诱导作用， 能提高次级代谢产物的产量。例如，蛋氨酸