[医药卫生]脱落细胞学制片.ppt

痰 采集： 颗粒状痰、血丝、血痰、泡沫痰、黄痰、铁锈痰 制片 拉片 固定 95%酒精 30-60分钟 染色 HE染色 固定、染色 1、放入95%酒精固定30-60分钟以上。 2、从固定液拿出后，不经水洗，立即放入 苏木素染色3-5分钟。（苏木素最好专用，痰 涂片不能与胸腹水等涂片一同染色，以防污染） 3、水洗。 4、1%盐酸酒精分化。 5、温水蓝化。 6、依红染色 1-2 秒 7、75%、85%、95%（2道）、100（2道） 酒精脱水。 8、二甲苯透明。 9、封片。（不能干燥，否则会引起细胞收缩和黑色空气结晶） 胸腹水、尿等液体 细胞学制片存在的问题： 1、有效细胞数量少（造成漏诊） 2、细胞退变、结构不清（造成误诊断） 液体标本制片规范 1、取液：轻轻的把送检液体上部倒掉，取下层液体，放入离心管。也可直接吸取底部液体。 2、转速3000/分，2-5分钟。 3、制片方法：看沉淀物的量（液体的清亮度）多少而区别对待： （1）一般量制片： 细胞很少的标本 血多细胞量少的标本 如果细胞沉淀物多，可将吸管中的空气挤出，直接把吸管插入沉淀物中，轻轻吸出沉淀物，直接涂片。 吸取上层沉淀物，放入25%酒精或冰醋酸酒精液内（25ml酒精+10ml冰醋酸+65ml水）内，打匀，再离心沉淀。然后，吸取沉淀物。 需要注意的是，处理后的细胞形态与排列方式都会发生不同程度的改变，所以，不是可诊断细胞量少，尽可能不用。液基细胞学也是如此。 但是，经过处理的胸腹水细胞多多少少总有褪变，因此，不是血液太多，细胞成份太少，一般不采用破红细胞法。 脱落细胞制片的关键 立即固定： 当细胞涂片完成后，应立即放入95%酒精液体内固定，至于固定液：如甲醇、酒精乙醚液等效果无明显差异。细胞的褪变主要原因不是固定液的种类，而是在制片过程中空气的氧化过程---干燥。 固定时间：5分钟即可。 剩下的送检液体不要立即倒去，等阅片完成后，看看需不需要再制片做免疫组化或制成组织块。（可放在冰箱内，也可放在室温状态下24小时以上） 染色 1、从固定液拿出后，不经水洗，立即放入 苏木素染色3-5分钟。 2、水洗。 3、1%盐酸酒精分化（不能用1%盐酸水溶液分化）。 4、温水蓝化。 5、依红染色 1-2 秒 6、75%、85%、95%（2道）、100（2道） 酒精脱水。 7、二甲苯透明。 8、封片。（不能干燥，否则会引起细胞收缩和黑色空气结晶） 细胞蜡块制作 细胞量少的话可以加入琼脂: （1）取底部沉淀样本，2000转/分，离心5分钟；如细胞量少，可重复离心。 （2）吸干上清液，离心沉渣用10%中性福尔马林固定1小时。 （3）吸出沉淀及少量固定液放于锥形离心管中。 （4）2000转/分离心15分钟，吸去上清液，轻轻斜置试管，用吸水纸或棉签吸去多余的液体。 （5）滴加少许已经融化的琼脂，摇动试管使其充分混合，并将试管放入冰箱冷藏20分钟，待混合液呈凝胶状。 （7）用尖头的硬签挑出锥形的琼脂块，切去多余的琼脂。 （8）放入脱水盒，用10%中性福尔马林液，固定2小时，常规脱水程序内处理。 也可以加入蛋清: （1）取底部沉淀样本，2000转/分，离心5分钟；如细胞量少，可重复离心。 （2）加鸡蛋清lml，用尖头的硬签轻轻刮取试管底部的细胞，尽量使细胞成团悬浮于蛋清中，2000转／分，离心5分钟。 （3）去除多余蛋清，沿管壁轻轻加入10 %中性福尔马林固定液。蛋清遇到福尔马林立即凝固使细胞成团块状，轻轻摇动，让细胞团块悬浮于固定液中固定2小时。 （4）取出细胞团块，用包埋纸包好，放入脱水盒，10%中性福尔马林固定2小时，常规脱水程序内处理。 液基细胞学 膜式细胞学 沉降离心式 液基细胞学制片的关键 1、去除粘液： 用公司配的洗涤液去除，但效果不是很明显，可用纱布或过滤网过滤。 2、去除红细胞： 离心、沉淀物用冰醋酸洗涤，再离心。 膜式与沉降式区别 非妇科标本 个人观点 妇科标本，膜式细胞大、平铺，比沉降式细胞更容易识别。 胸腹水等细胞量较多的标本，做液基细胞意义不大，而细胞量较少的标本如：尿、胸脊液等，沉降式细胞量较多。 穿刺标本、纤支镜用液基法会把细胞结构打散