[工学]高效液相色谱2.pptVIP

正相HPLC 流动相极性小于固定相极性的情况即正相色谱(Normal Phase Chromatography)。正相色谱采用极性吸附剂（或极性键合相）如硅胶、氧化铝或带有氰基、二醇基和氨基的极性固定相，非极性流动相操作模式，依据溶质分子的极性大小进行分离。 溶质分子与固定相的硅醇基等极性基团产生特异的极性相互作用。 极性相互作用大的保留时间大，反之保留时间小。洗脱顺序：非极性、弱极性、极性。 应用：石油化工产品、染料、农药、医药、有机酸、有机碱等 反相HPLC 流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱 (Reverse Phase Chromatography)。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛，现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。 保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大，对于非极性化合物通常遵循以下规则：(弱)非键合硅胶 氰基 C1(TMS) C3 C4 苯基 C8 ≈ C18(强)． 洗脱顺序：极性、弱极性、非极性 应用：小分子化合物、蛋白质、多肽等 离子交换HPLC 离子交换（ion-exchange HPLC）是用离子交换剂作固定相，根据不同组分在一定pH下，组分电荷性质和数量不同而分离的技术。 分为阳离子交换树脂和阴离子交换树脂两类 应用：核酸、蛋白质、氨基酸等 凝胶HPLC