光合色素的色层分析-建中.PDFVIP

光合色素的色層分析 www.sciences.fundp.ac.be/. ../photosynthese.htm 色層分析法 (chromatography) 用來 分離並確認化合物的技術 主要組成： 固定相 (stationary phase) 流動相(mobile phase) 原理： 利用混合物中物質對固定相及 流動相 親和力的不同，造成分離效果 與固定相親和力大者，易滯留原地 與流動相親和力大者，易隨流動相移動 種類 氣相色層分析 (GC , gas chromagraphy) 薄層色層分析 (TLC , thin layer chromagraphy) 濾紙色層分析 (PC , paper chromagraphy) 濾紙色層分析 最簡單的色層分析法 固定相－吸附在 濾紙中的水(極性) 移動相－ 一種或數種混合的有機溶劑 (非極性) 石油醚： 90% 丙酮 9 ： 1 Rf值 (retention factor value) 色素移動距離 Rf value = 展開液移動距離 計算色素 的b Rf值 Xcm Rf值＝ Ycm Rf值的應用 鑑定未知物 單一化合物以同樣的層析法分離 時，必有其特定的 Rf值，所以鑑 定一些未知化合物時，將測得的 Rf值和標準物質的 Rf值對照比 較，即可初步確定此未知化合物 的所屬類別和名稱。 光合色素 /.../ photosyn.htm 葉綠素a 主要光合色素 呈 深綠色 分子式 C H O N Mg 55 72 5 4 葉綠素b 主要光合色素 呈 淡綠色 分子式 C H O N Mg 55 70 6 4 胡蘿蔔素 厭水性 呈鉻黃色 分子式C40 H56 葉黃素 親水性 呈 淡黃色 分子式C40 H56O2 實驗步驟 配置展開液 展開液： 4.5ml石油醚＋ 0.5ml 90% 丙酮 石油醚：( 90% 丙酮＝9 ：1) (★務必精準配置) 置於 100ml量筒中，量筒口以鋁箔密封 ＊極性大小依序為：水 丙酮石油醚 萃取光合色素 取適量烘乾菠菜葉 ⇒捏碎後放入研缽中，研磨成粉末 ⇒加10 ml 90%丙酮充分研磨 ⇒ 以雙層紗布過濾，取濾液 層析 取一長條濾紙，將前端剪成尖形， 並以鉛筆在離尖端3cm