第六章酶的作用机制和酶的调节.ppt

2）别构效应剂： 引起别构效应的物质。分两种： 别构激活剂： 正协同，加快反应速度的，多为S 。 如：ATP对ATCase。 别构抑制剂： 负协同，减慢反应速度，多为代谢终产物。 如：CTP对ATCase。 别构酶通常为代谢途径第一个酶或分支点上第一个酶。 3、别构酶动力学曲线： 大多数别构酶不 符合米氏方程。 1、非调节酶曲线 2、正协同别构酶 3、负协同别构酶 曲线2中[S]的变化所引起的速度变化 的反应几乎是“全”或“无” 别构酶的底物浓度与反应速度之间的关系不符合米氏方程，曲线呈“S”型。 Asp转氨甲酰酶 （二）诱导酶与结构酶 结构酶：指细胞内固有酶类，无需S存在， 含量稳定，受外界影响小。 诱导酶：加入特定诱导物后细胞才能产生 的酶。其含量受诱导物存在而提高。 诱导物：多为S、P或其结构类似物。 事实证明：酶的生物合成受遗传基因和代谢物的双重控制。 乳糖操纵子 （三）同工酶 概念：指能催化相同的化学反应，但其结构和理化性质及反应机理都有所不同的一组酶。 应用： 在细胞分化及形态遗传的分子学基础研究中很重要； 在代谢调控中起重要作用； 作为疾病诊断的指标。如乳酸脱氢酶（LDH） （四）酶原的激活： 1、概念： 酶原（proenzyme)： 没有催化活性的酶的前体(precursor)。 酶原激活（活化）： 从不具活性的酶原转变为有活性的酶的过程。 其实质是一个或一些专一的肽被裂解，使酶活性中心形成或暴露的过程。如： 胃蛋白酶原 胃蛋白酶+ 42肽 HCl 胰蛋白酶原激活 胰蛋白酶原 胰蛋白酶 + 6肽 肠激酶 糜蛋白酶原的激活 2、生物学意义： 保护意义：消化道酶原； 储存意义：凝血酶原。 （五） 酶的共价修饰 通过共价调节酶进行调控 1. 蛋白质的磷酸化 2. 蛋白激酶 （1）PKA （2）PKC （3）磷酸化酶激酶（PhK） （4）蛋白酪氨酸激酶（PTK） 糖原磷酸化酶和糖原合成酶活性的调节 糖原的合成 糖原合成酶a (脱磷酸化，有活性) 糖原磷酸化酶b (脱磷酸化，无活性) ATP ADP Pi H2O 糖原合成酶b （磷酸化，无活性) 糖原磷酸化酶a （磷酸化，有活性） ATP ADP Pi H2O 糖原的分解 第六章 酶的作用机制和酶的调节 新疆农业大学农学院生物化学教研室 王希东 TEL：8763713 E-mail：wxdxnd@163.com wxd4085_cn@ 本章主要内容 1. 酶的活性中心（活性部位） 2. 酶催化反应的独特性质 3. 影响酶催化效率的有关因素 4. 酶活性的调节 一、酶的活性中心 （active center) （一）概念： 活性中心：酶分子中直接与底物结合并和酶的催化作用直接有关的空间部位。 羧肽酶的活性中心 实验：酶蛋白经水解切去部分肽链后，残留部分仍有活性。 说明：参与催化反应的只是其中一小部分，即活性中心。 （二）活性中心的特点： 1、仅为酶体积的很小部分； 2、具有一定的空间构象； 3、S与E靠次级键结合； 4、是由特定空间构象维持的一个裂隙。在一级结构上可能相距很远，或在不同的肽链上，但在空间结构上却相距很近。 5、酶的活性部位并不是和底物的形状正好互补的，在结合过程中，其中一个或两者同时发生构像改变后才互补的。 溶菌酶活性中心 锁钥学说与诱导契合学说 锁钥学说： 1894年E.Fischer 提出：S分子或其一部分像钥匙一样楔入E活性中心部位。 此学说强调E与S结构互相吻合(刚性模板)。 诱导契合学说 1958年Koshland 提出：当E与S接近时， E蛋白受S分子的诱 导，其构象发生有 利于S结合的变化， E与S在此基础上互 补契合、进行反应。 （三）研究酶活性中心的方法： 1、通过研究专一性底物判断确定E活性中心的结构； 2、用化学修饰法共价修饰E分子的一些功能基团，以查出哪些基团是活性必需的； 3、X-衍射直接探明活性中心。 4、定点诱变法 5、亲和标记法（affinity labeling） 二、酶催化反应的独特性质 1.酶反应可分两类： （1）涉及电子转移 转换数在108s-1 （2）涉及电子和质子两者或其他基团转移 转换数在103s-1 大多属于此类 2.酶的催化作用是由氨基酸侧链上的功能基团和辅酶为媒介的