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[自然科学]第十二章 RNA生物合成
第十二章 RNA生物合成 RNA transcription [概述]:DNA转录RNA前体 加工成熟RNA的过程 RNA合成的两种方式: 1、 DNA指导的 RNA合成。 2、 RNA指导的 RNA合成。 第一节 转录作用 一、转录作用及特点 由DNA指导的RNA合成, DNA以碱基互补原则,决 定合成RNA的全部碱基成分及排列顺序,将DNA模板 上的遗传信息传递到RNA分子的过程为转录作用。 1、反应体系: DNA模板,NTP,酶,Mg2+,Mn2+,合成 方向5’?3’。连接方式-- 3’ , 5’磷酸二酯键。 2、转录特点: ?不对称转录(asymmetric transcription) DNA片段转录时,双链DNA中只有一条链作为转录 的模板,这种转录方式称作不对称转录。(图12-1 模板链及反意义链:(template strand) 指导RNA合成的DNA模板链。 编码链及有意义链:(coding strand) 不作为转录的另一条DNA链。 (图12-2) 由于基因分布于不同的DNA单链中,即某条DNA单 链对某个基因是模板链,而对另一个基因则是编 码链。 ?原料:四种磷酸核苷NTP,DNA中的A在RNA中变为U ?合成过程是连续的,方向: 5’?3’ ?合成部位:细胞核内 二、原核RNA聚合酶 [组成]:5个亚基,?2??’?为全酶, ?2??’为核心酶。 [作用]: ? 识别DNA分子中转录的起始部位。 ?促进与模板链结合,并使DNA双链打开17bp.。 ?催化NTP的聚合,完成一条RNA链的聚合反应。 ?识别转录终止信号,停止聚合反应,参与转录 水平的调控。(图12-3) [特点]: ?聚合速率慢,30~85NTP/秒。 ?缺乏外切酶活性,无校对功能,错误率10-6。 ?不同的?识别不同的启动子。例:?32识别热休 克启动子。 ?可被药物抑制(利福平)。人的RNA聚合酶对利 福平不敏感。利用此特点可研制杀菌药物。 三、真核RNA聚合酶 真核较原核的酶复杂,已清楚的有Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ及Mt 4 型。(表12-1) [组成]:均由多亚基构成,聚合酶Ⅱ中的某个亚基与原核聚合酶的?亚基高度同源。 四、启动子及终止子(promoter,terminator,stop signal) (一)启动子 1、原核启动子:[结构]约55bp,分为起始点(start site)、结合部位、识别部位。 [功能] ?起始点:转录起始部位以+1表示,转录的 第1个核苷酸常为嘌呤---G,A。 ?结合部位:约6bp组成,是高度保守区,共有序列 为5’-TATAAT-3’ ,位于起始点上游-10。因Tm低,DNA 易解开双链,为RNA聚合酶提供场所。 ?识别部位:约6bp组成,在-35处,为高度保守区,序 列5’-TTGACA-3’, ?因子识别此部位。(图12-4) 2、真核启动子结构(以RNA polⅡ为例) ?于-25处含AT富集区, 共有序列TATAA(TATA box) ?-70处含共有序列CAAT ,还含许多其它box ,例如 GC box,E-box等。(图12-5) ?含增强子[enhancer]和静息子[silencsr] RNA polⅠ和 RNA polⅢ与聚合酶Ⅱ所识别的启动 子差异较大。 (二)终止信号:(图12-6) 特点:终止部位含GC富集区与AT富集区,它们分别 形成发卡结构和连续的U区,以终止转录。 蛋白?因子辅助识别终止信号,参与终止。 五、转录过程 (以原核为例) (一)起始 RNA聚合酶-σ识别起始位点 ↓ 核心酶与DNA结合 ↓ E ? 以核心酶 DNA构象改变→局部双链打开17bp→NTP形成3’,5’二酯键 形式沿
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