生物选修三小结.pptVIP

小结 * 基因工程 的工具 限制酶 主要存在于原核生物中 具有专一性(识别序列) 切开DNA分子的磷酸二酯键 DNA连 接酶 连接磷酸二酯键 种类 E.coliDNA连接酶 T4 DNA连接酶 运载 工具 条件 能自我复制 具多个限制酶切位点 具标记基因等 安全 对受体无害 大小适宜 方便操作 质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒等 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR技术 人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 复制原点 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法、感受态法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否导入、转录、翻译 过程 变性、退火、延伸三步曲 变性：加热至90～95℃ 氢键断裂，双链DNA解链成为单链DNA 退火：冷却至55～60℃ 引物与模板的单链DNA互补配对结合 延伸：加热至70～75℃ 以目的基因为模板，合成互补的新DNA链 变性 退火 延伸 2.基因表达载体的组成 目的基因 启动子 终止子 标记基因 位于基因的首端, RNA聚合酶识别和结合位点，转录起点 位于基因的末端,终止转录 检测目的基因是否导入受体细胞和筛选含目的基因的细胞 它们有什么作用？ 编码蛋白质的结构基因 复制原点 复制的起点 常用的受体细胞： 大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等 三、将目的基因导入受体细胞 方法 将目的基因导入 植物细胞 将目的基因导入 动物细胞 将目的基因导入 微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 ——显微注射法 ——感受态细胞 *